凡购买上海闳巨生物ELISA酶联免疫分析试剂盒生产厂家任何一种ELISA检测试剂盒,均可享受我司提供免费的ELISA试剂盒代测服务,需要代测单位的试验材料和试剂等均须采用特快专递形式邮寄,有低温要求的、固定要求的,按低温保存、固定防碎方法运输,以确保实验物品的安全可靠。如数量巨大,我司可以让专业人员前往提取ELISA试剂盒实验样本。详情请与我司销售人员联系。
闳巨生物ELISA酶联免疫分析试剂盒生产厂家部分合作单位:中科院﹑医科院﹑农科院等科研院所﹑北京大学,复旦大学、解放军总医院,黑龙江省医院,第一军医大学、安徽省农科院、浙江大学等大学院校的重点实验室选用。
人L苯丙氨酸解氨酶PAL ELISA试剂盒 产品资料:
【产品名称】:人L苯丙氨酸解氨酶PAL ELISA试剂盒
【产品用途】:被测样品定性定量分析
【产品规格】:96T/48T(两种规格)
【检测方法】:酶免法/酶联免疫法(ELISA)
【保存条件】:2-8℃
【供 货 期】:1-3天(现货供应)
【产品性状】:液体盒装
【产品价格】:含税含运费,我们全程提供ELISA实验技术指导和ELISA试剂盒免费代测
【销售优势】:价格行业优势、质量可靠、如果出现客观质量问题包换退
【待检样本】:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等
【保 质 期】:半年(六个月)
人L苯丙氨酸解氨酶PAL ELISA试剂盒 应用领域:
ELISA法是免疫诊断中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定,根据已经使用的结果,认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查,而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此,也适合于血清流行病学调查。本法不仅可以用来测定抗体,而且也可用于测定体液中的循环抗原,所以也是一种早期诊断的良好方法。
因此ELISA法在生物医学各领域的应用范围日益扩大,可概括四个方面:
1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位。
2、研究抗酶抗体的合成。
3、显现微量的免疫沉淀反应。
4、定量检测体液中抗原或抗体成份。
人L苯丙氨酸解氨酶PAL ELISA试剂盒 产品优势:
1)人小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体3ELISA试剂盒能够对天然蛋白进行检测,更接近信号传递相关蛋白天然构象,结果更加真实。
2)可信能够进行定量或半定量检测,将Western blot的将条带形式转化为可以量化的吸收值,客户可以通过数据可以进行有效的统计学分析。
3)便于大量样本筛查,在96孔板内进行分析,便于数据的规模化读取和分析,非常适合客户进行高通量分析。
4)具有不同通量的产品线,可以满足不同通量要求的信号通路蛋白分析,客户可以利用此产品线获得大量数据。
5)灵敏度高,客户可以对微小的蛋白修饰变化进行精细分析。
6)检测范围广,客户能够有效对不同丰度和修饰状态的蛋白进行广泛分析。
7)试剂盒设计合理,每一套产品,我们都精心设计了实验,将所有实验所需的溶液和耗材标准化,节省客户的时间和精力,得到最为标准可信的数据。
8)实验可重复性高,该产品线所得数据可信,便于设立复孔,质量控制更加严密,可重复性和稳定性较高。
闳巨生物ELISA酶联免疫分析试剂盒生产厂家对试剂的质量保证与免责声明:
1、我们保证向用户提供完全合格的产品。如您认为产品确实存在质量问题,请在收到产品21天内并且产品使用量没有超过一半前以书面方式提出,否则将不予受理或赔偿。同时产品赔偿只限于产品价值本身,不涉及其他任何损失。我们承诺随时为您提供专业的技术指导。
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ELISA酶联免疫分析试剂盒生产厂家订购流程:
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人抗乙型肝炎病毒核心IgG抗体(HBcAb-IgG)elisa试剂盒主要用于科研方面,不用于临床诊断。可以用于检测各种指标。 试剂盒主要分为以下系列:1.细胞因子检测试剂盒 2.内分泌检测试剂盒 3.肝纤维化检测试剂盒 4.心肌梗塞检测试剂盒 5.肿瘤标志物检测试剂盒 6.自身免疫检测试剂盒 7.优生优育检测试剂盒 8.传染病检测试剂盒 等等;各种种属有:人、大小鼠、豚鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊;植物。标本齐全:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水等等;人抗乙型肝炎病毒核心IgG抗体(HBcAb-IgG)elisa试剂盒组成及试剂配制 1. 酶联板:一块(96孔) 2. 标准品(冻干品) 3. 样品稀释液:1×20ml。4. 检测稀释液A:1×10ml。5. 检测稀释液B:1×10ml。6. 检测溶液A:1×120μl(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100μl/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。7. 检测溶液B:1×120μl/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。8. 底物溶液:1×10ml/瓶。 9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。 11. 覆膜:5张12. 使用说明书:1份 自备物品 1. 酶标仪(建议参考仪器使用说明提前预热) 2. 微量加液器及吸头,EP管3. 蒸馏水或去离子水,全新滤纸 人抗乙型肝炎病毒核心IgG抗体(HBcAb-IgG)elisa试剂盒标本的采集及保存 1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。3. 其它生物标本:请1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。4. 样本处理:血清或血浆标本推荐稀释5,000倍。注:以上标本置4℃保存应小于1周,-20℃或-80℃均应密封保存,-20℃不应超过1个月,-80℃不应超过2个月;标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。 注:1. 试剂准备:所有试剂都必须在使用前达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存试剂。 实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。2. 加样:加样或加试剂时,请注意在吸取标本 / 标准品,酶结合物或底物时,第一个孔与最后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的 “预孵育"时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)最好控制在10分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。3. 孵育:为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜,以避免液体蒸发;洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。4. 洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响最后的酶标仪读数。5. 试剂配制:Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用,并使用相应的稀释液配制,不能混淆。请精确配置标准品及工作液,尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时,一次不要小于10μl),以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差;请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。6. 反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。7. 底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射。 建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。 如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请最后乘以稀释倍数。 洗板方法1. 手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。2. 自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。 计算 以标准物的浓度为纵坐标(对数坐标),OD值为横坐标(对数坐标),在对数坐标纸上绘出标准曲线。推荐使用专业制作曲线软件进行分析,如curve expert 1.3,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度,再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 ◇ 注意事项:收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时,-20℃可保存1个月。-70度可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。 ◇ 液体类标本标本必须为液体,不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血浆。每个标本量收集体积=100ul×检测种类。取材前须向销售人员索要说明书。 ◇ 血清:室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。 ◇ 血浆:应根据试剂盒的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,加入10%(v/v)抗凝剂(0.1M柠檬酸钠或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。 ◇ 尿液、胸腹水、脑脊液:用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。 ◇ 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。 ◇ 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,缓冲液中可加入1μg/L蛋白酶抑制剂或50U/ml的Aprotinin(抑肽酶)。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清置于-20度或- 70度保存,如有必要,可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
人原钙黏素1(PCDH1)ELISA Kit ELISA. 96T人白介素2受体(IL-2R)ELISA Kit ELISA. 96T人皮肤T细胞虏获趋化因子(CTACK/CCL27)ELISA KitELISA. 96T人胸肾表达趋化因子(BRAK/CXCL14)ELISA KitELISA. 96T人B-淋巴细胞趋化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA Kit ELISA. 96T人结缔组织活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA Kit ELISA. 96T人巨噬细胞集落刺激因子受体(M-CSFR)ELISA KitELISA. 96T人免疫球蛋白A Fc段受体Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA Kit ELISA. 96T人免疫球蛋白E Fc段受体Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)ELISA Kit ELISA. 96T人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA Kit ELISA. 96T人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA Kit ELISA. 96T人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA Kit G Fc段受体Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA Kit ELISA. 96T人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA Kit ELISA. 96T人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA Kit ELISA. 96T人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA Kit ELISA. 96T人粒细胞趋化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA KitELISA. 96T人ω干扰素(IFN-ω)ELISA Kit ELISA. 96T人糖基化依赖的细胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA Kit ELISA. 96T人干扰素调节因子(IRF)ELISA Kit ELISA. 96T人淋巴毒素β(LTB)ELISA Kit ELISA. 96T人淋巴毒素α(LTA)ELISA Kit ELISA. 96T人CC趋化因子受体1(CCR1)ELISA KitELISA. 96T人CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)ELISA KitELISA. 96T人肺部活化调节趋化因子(PARC/CCL18)ELISA Kit ELISA. 96T人黏膜地址素细胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA KitELISA. 96T人β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA KitELISA. 96T人可溶性CD38(sCD38)ELISA KitELISA. 96T人可溶性CD21(CR2/sCD21)ELISA Kit ELISA. 96T人可溶性瘦素受体(sLR)ELISA KitELISA. 96T人Toll样受体9(TLR-9/CD289)ELISA kitELISA. 96T人转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA Kit ELISA. 96T人单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA Kit ELISA. 96T人白三烯D4(LTD4)ELISA KitELISA. 96T人N钙黏蛋白/神经钙黏蛋白(N-Cad)ELISA Kit ELISA. 96T人肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)ELISA Kit ELISA. 96T人红细胞刺激因子(ESF)ELISA Kit ELISA. 96T人肿瘤坏死因子相关激活诱导因子(TRANCE)ELISA Kit ELISA. 96T人生长激素释放因子(GH-RF)ELISA Kit ELISA. 96T人巨噬细胞趋化因子(MCF)ELISA Kit ELISA. 96T人α/β干扰素受体(IFN-α/βR)ELISA Kit ELISA. 96T人B细胞生长因子(BCGF)ELISA Kit ELISA. 96T人B细胞分化因子(BCDF)ELISA Kit ELISA. 96T人上皮细胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA Kit ELISA. 96T人可溶性粘附分子(Sam)ELISA Kit ELISA. 96T人巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA KitELISA. 96T人可溶性血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA KitELISA. 96T人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)ELISA KitELISA. 96T人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA KitELISA. 96T人多效生长因子(PTN)ELISA KitELISA. 96T人可溶性CD28(sCD28)ELISA KitELISA. 96T人淋巴细胞因子ELISA KitELISA. 96T人胸腺活化调节趋化因子(TARC/CCL17)ELISA Kit ELISA. 96T人神经细胞粘附分子配体1(NCAM-L1/CD171)ELISA Kit ELISA. 96T人神经保护因子(CVNPF)ELISA Kit ELISA. 96T人可溶性肿瘤坏死因子α受体(sTNFαR)ELISA KitELISA. 96T人可溶性细胞因子受体(sCKR)ELISA KitELISA. 96T人可溶性凋亡相关因子配体(sFASL)ELISA KitELISA. 96T人细胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA KitELISA. 96T人集落刺激因子(CSF)ELISA KitELISA. 96T人γ干扰素诱导单核细胞因子(MIGF/CXCL9)ELISA KitELISA. 96T人干扰素诱导T细胞趋化因子(ITAC/CXCL11)ELISA KitELISA. 96T人CD14分子(CDl4)ELISA KitELISA. 96T人凋亡诱导因子(AIF)ELISA KitELISA. 96T人白细胞共同抗原(LCA/CD45)ELISA KitELISA. 96T人CD4分子(CD4)ELISA KitELISA. 96T人P钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白(P-cad)ELISA Kit ELISA. 96T人角化细胞生长因子(KGF)ELISA KitELISA. 96T人血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)ELISA KitELISA. 96T人CXC趋化因子配体16(CXCL16)ELISA KitELISA. 96T人CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA KitELISA. 96T人γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA KitELISA. 96T人基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA KitELISA. 96T人淋巴细胞趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA KitELISA. 96T人α干扰素(IFN-α)ELISA KitELISA. 96T人可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA KitELISA. 96T人白介素27(IL-27)ELISA KitELISA. 96T人白介素23(IL-23)ELISA KitELISA. 96T人巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISA KitELISA. 96T人组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA KitELISA. 96T人干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA KitELISA. 96T人白介素1(IL-1)ELISA KitELISA. 96T人白介素17(IL-17)ELISA KitELISA. 96T人白介素1β (IL-1β)ELISA KitELISA. 96T人表皮生长因子(EGF)ELISA KitELISA. 96T人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)ELISA KitELISA. 96T人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA KitELISA. 96T人可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA KitELISA. 96T人可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA KitELISA. 96T人细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA KitELISA. 96T人细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA KitELISA. 96T人结缔组织生长因子(CTGF)ELISA KitELISA. 96T人白介素18(IL-18)ELISA KitELISA. 96T人粘膜相关上皮趋化因子(MEC/CCL28)ELISA Kit ELISA. 96T人粘膜相关上皮趋化因子(MEC/CCL28)ELISA Kit ELISA. 96T人B细胞活化因子受体(BAFF-R)ELISA Kit ELISA. 96T人血管内皮细胞生长因子受体3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA KitELISA. 96T人血管内皮细胞生长因子受体1(VEGFR-1/Flt1)ELISA KitELISA. 96T人血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)ELISA KitELISA. 96T人血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)ELISA KitELISA. 96T人血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)ELISA KitELISA. 96T人血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)ELISA KitELISA. 96T人血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)ELISA KitELISA. 96T人血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA Kit ELISA. 96T人血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA kit ELISA. 96T人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)ELISA KIT ELISA. 96T人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4(TRAIL-R4)ELISA KitELISA. 96T人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3(TRAIL-R3)ELISA KitELISA. 96T人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(TRAIL-R1)ELISA KitELISA. 96T人肿瘤坏死因子β(TNF-β)ELISA KitELISA. 96T人肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA KIT ELISA. 96T人肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA KitELISA. 96T人肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA KitELISA. 96T人转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA kitELISA. 96T人转化生长因子α(TGF-α)ELISA KitELISA. 96T人基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA kit *ELISA. 96T人干细胞因子受体(SCFR)ELISA Kit *ELISA. 96T人干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)ELISA Kit *ELISA. 96T人可溶性CD40配体(sCD40L)ELISA Kit *ELISA. 96T人可溶性CD30配体(sCD30L)ELISA Kit *ELISA. 96T人正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA kit ELISA. 96T人P选择素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA KitELISA. 96T人血血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)ELISA KitELISA. 96T人血血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)ELISA KitELISA. 96T人神经营养因子4(NT-4)ELISA KitELISA. 96T人神经营养因子3(NT-3)ELISA KitELISA. 96T人的神经生长因子(NGF)ELISA kit ELISA. 96T人巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA KitELISA. 96T人巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA KitELISA. 96T人巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA kit ELISA. 96T人巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA KitELISA. 96T人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)ELISA KitELISA. 96T人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)ELISA KitELISA. 96T人巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA KitELISA. 96T人单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA KitELISA. 96T人单核细胞趋化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA KitELISA. 96T人单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA KitELISA. 96T人L选择素(L-Selectin/CD62L)ELISA KitELISA. 96T人白介素9(IL-9)ELISA KitELISA. 96T人白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA KIT ELISA. 96T人白介素6(IL-6)ELISA KIT ELISA. 96T人白介素-5(IL-5)ELISA KitELISA. 96T人白介素4(IL-4)ELISA KitELISA. 96T人白介素3(IL-3)ELISA KitELISA. 96T人白介素2可溶性受体β链(IL-2sRβ )ELISA KitELISA. 96T人白介素2可溶性受体α链(IL-2sRα/CD25)ELISA KitELISA. 96T人白介素2(IL-2)ELISA kit ELISA. 96T人白介素1α(IL-1α )ELISA KitELISA. 96T人白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA KitELISA. 96T人白介素1可溶性受体Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA KitELISA. 96T人白介素16(IL-16)ELISA KitELISA. 96T人白介素13(IL-13)ELISA KitELISA. 96T人白介素12(IL-12/P70)ELISA KitELISA. 96T人白介素12(IL-12/P40)ELISA KitELISA. 96T人白介素11(IL-11)ELISA KitELISA. 96T人白介素10(IL-10)ELISA KIT ELISA. 96T人胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)ELISA KitELISA. 96T人胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)ELISA KitELISA. 96T人胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)ELISA KitELISA. 96T人胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)ELISA KitELISA. 96T人胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA KitELISA. 96T人胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA Kit ELISA. 96T人γ干扰素(IFN-γ)ELISA Kit ELISA. 96T人细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA KIT ELISA. 96T人肝细胞生长因子(HGF)ELISA kit ELISA. 96T人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA KitELISA. 96T人胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)ELISA KitELISA. 96T人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA KitELISA. 96T人中性粒细胞趋化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA KitELISA. 96T人趋化因子(fractalkine/CX3CL1) ELISA KitELISA. 96T人碱性成纤维细胞生长因子9(bFGF-9)ELISA KitELISA. 96T人碱性成纤维细胞生长因子6(bFGF-6)ELISA KitELISA. 96T人碱性成纤维细胞生长因子4(bFGF-4)ELISA KitELISA. 96T人酸性成纤维细胞生长因子1(aFGF-1)ELISA KitELISA. 96T人凋亡相关因子配体(FASL)ELISA KitELISA. 96T人凋亡相关因子(FAS/CD95)ELISA KitELISA. 96T人E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA kit ELISA. 96T
植物维生素D(VD)elisa试剂盒
Plant Vitamin D,VD ELISA Kit
96孔酶标包被板
48孔酶标包被板
植物维生素D(VD)ELISA试剂盒 种属:人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。【免费代测】
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广锐Elisa试剂盒常年低价,提供免费代测超低价格、质量!
Human salivary duct autoantibody,SDA ELISA Kit
人elisa试剂盒常年优惠,人狼疮抗凝抗体ELISA试剂盒,(LAC/LA)Elisa试剂盒
8-iso-PG kit,人(8-iso-PG)Elisa试剂盒
Elisa试剂盒规格,96T/48T
兔子elisa试剂盒,兔子基质金属蛋白酶9ELISA试剂盒,(MMP-9)Elisa试剂盒
Elisa试剂盒规格,96T/48T
Elisa试剂盒规格,96T/48T
人抗麦胶蛋白/麦醇溶蛋白抗体(AGA)ELISA试剂盒
Rat Glucose-dependent insulin-releasing polypeptide,GIP ELISA Kit
大鼠白介素2可溶性受体α链(IL-2sRα/CD25)ELISA试剂盒
Elisa试剂盒规格,96T/48T
GSK kit,人(GSK)Elisa试剂盒
PoFAine Interferon α,IFN-α ELISA Kit
植物维生素D(VD)ELISA试剂盒
试剂盒性能:
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%
植物维生素D(VD)ELISA试剂盒 全国厂家直接销售:北京、上海、广州、深圳、江苏、青岛、山东、东北等全国各省市区均现货销售,送货上门
植物维生素D(VD)ELISA试剂盒,Elisa价格,说明书
人角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)elisa试剂盒说明书:待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆等。
ELISA试剂盒检测范围:
ELISA试剂盒检测范围:
人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
ELISA试剂盒检测类型:双抗体夹心法测抗原、双抗原夹心法测抗体、间接法测抗体、竞争法测抗体、竞争法测抗原、捕获包被法测抗体、ABS-ELISA法。
人肿瘤坏死因子α转化酶(TACE)ELISA检测试剂盒每次实验的标准曲线一般设7个不同浓度,加上空白孔,标准曲线一共需要8个孔。因此,一个48T试剂盒最多可以测定40个样本(不做重复且一次用完),一个96T试剂盒最多可以测定88个样本(不做重复且一次用完)。可以根据实际样本数量和实验计划选择合适的产品规格。
操作注意事项:
1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
2.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
3.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
5.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
7.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
9.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
人角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISA试剂盒说明:标本的采集及保存1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过一晚后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。3.细胞培养物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。标本的稀释原则:首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。最后计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为300 pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。如配制150 pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。生物素标记抗体的稀释原则:临用前以生物素标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则:临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。操作步骤实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。注:1. 用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。2. 每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是最后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。3. 为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。4. 未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。5. 建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。洗板方法手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。计算以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1. 当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。2. 洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。3. 一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。5. 如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请最后乘以稀释倍数。6. 在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。7. 底物请避光保存。8. 不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。人角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISA试剂盒笃玛生物相关促销产品DM00658 人血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒DM00256 人类凋亡抑制因子4(API4)ELISA试剂盒 DM00895 人血管生长素(ANG)ELISA试剂盒DM00258 人角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISA试剂盒DM00756 人血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA试剂盒DM00757 人血管紧张素转化酶(ACE)ELISA试剂盒DM00758 人环磷酸腺苷(cAMP)ELISA试剂盒DM00759 人白细胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA试剂盒DM00760 人活化素A(Activin-A)ELISA试剂盒DM00761 人凋亡相关因子(FAS/CD95)ELISA试剂盒DM00382 人E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA试剂盒 DM00762 人红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒 DM00763 人红细胞生成素受体(EPOR)ELISA试剂盒DM00764 人嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA试剂盒DM00765 人鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)ELISA试剂盒DM00766 人内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)ELISA试剂盒DM00767 人睫状神经营养因子(CNTF)ELISA试剂盒DM00768 人白细胞分化抗原30(CD30)ELISA试剂盒DM00769 人CXC趋化因子受体1(CXCR1)ELISA试剂盒DM00770 人XC趋化因子受体1(XCR1)ELISA试剂盒DM00771 人二级淋巴组织趋化因子(SLC/CCL21)ELISA试剂盒 DM00772 人E钙粘着蛋白/上皮性钙黏附蛋白(E-Cad)ELISA试剂盒DM00773 人骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA试剂盒DM00774 人骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)ELISA试剂盒DM00775 人骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA试剂盒DM00776 人骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA试剂盒DM00777 人β细胞素(BTC) ELISA试剂盒DM00778 人脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA试剂盒DM00779 人血管生成素2(ANG-2)ELISA试剂盒DM00780 人胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)ELISA试剂盒DM00781 人胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)ELISA试剂盒DM00782 人胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA试剂盒DM00783 人胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒 DM00784 人γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒 DM00516 人神经科粒素(NG/NRGN)ELISA检测DM00785 人细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA试剂盒 DM00786 人肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒 DM00787 人糖蛋白130(gp130)ELISA试剂盒DM00788 人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA试剂盒DM00789 人生长因子(HGH)ELISA试剂盒DM00790 人胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)ELISA试剂盒DM00791 人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA试剂盒DM00792 人中性粒细胞趋化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA试剂盒DM00793 人趋化因子(FK)ELISA试剂盒DM00794 人纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒DM00795 人碱性成纤维细胞生长因子9(bFGF-9)ELISA试剂盒DM00796 人碱性成纤维细胞生长因子6(bFGF-6)ELISA试剂盒DM00797 人碱性成纤维细胞生长因子4(bFGF-4)ELISA试剂盒DM00798 人酸性成纤维细胞生长因子1(aFGF-1)ELISA试剂盒DM00799 人凋亡相关因子配体(FASL)ELISA试剂盒DM00800 人白介素6(IL-6)ELISA试剂盒 DM00801 人白介素-5(IL-5)ELISA试剂盒DM00802 人白介素4(IL-4)ELISA试剂盒DM00803 人白介素3(IL-3)ELISA试剂盒DM00804 人白介素2可溶性受体β链(IL-2sRβ )ELISA试剂盒DM00805 人白介素2可溶性受体α链(IL-2sRα/CD25)ELISA试剂盒DM00806 人白介素2(IL-2)ELISA试剂盒
人胰岛素样生长因子2(IGF-2)elisa试剂盒@新闻动态 阿仪网 IGF-2 ELISA Kit 96T/48T
人胰岛素样生长因子2(IGF-2)elisa试剂盒@新闻动态 阿仪网
试剂盒产品说明:IGFBP(胰岛素样生长因子结合蛋)胰岛素样生长因子结合蛋白是一组能够和胰岛素样生长因子(IGF)以高亲和力结合的可溶性蛋白,综们不仅携带IGF,延长IGF的半衰期,而且还调控IGF的生物活性,影响IGF的分布IGFBP。血清中的IGFBP23的浓度受雌激素、甲状旁腺激素( PTH) 、糖皮质激素等调控,其中生长激素(GH)是IGFBP23 的主要调控因子。根据对肝、肾等组织的研究,在体外IGFBP23 的表达可由IL21、TNF2αTGF2β、维A酸、骨源性蛋白21、雌二醇、前列腺素E2、糖皮质激素和p53等调控。公司ELISA试剂盒优点介绍:
更灵敏、特异性好、重复性强、更环保、经济实惠、实验效果稳定
产品种属介绍:蝌蚪、骆驼、海马、蜗牛、马、大象、鸽子、类人猿、熊猫、貂、大鼠、小鼠、牛等动植物
人胰岛素样生长因子2(IGF-2)elisa试剂盒@新闻动态 阿仪网产品包装介绍:液体长方体盒装
产品保存介绍:恒温四度(专家建议)
肌肌酸激酶(CKM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Creatine Kinase, Muscle (CKM) 48T/96T JW-E307 Homo sapiens (Human)
核糖核酸酶T2(RNASET2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ribonuclease T2 (RNASET2) 48T/96T JW-E308 Homo sapiens (Human)
N-乙酰β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for N-Acetyl Beta-D-Glucosaminidase (NAGase) 48T/96T JW-E309 Homo sapiens (Human)
激活素AB(ACVAB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Activin AB (ACVAB) 48T/96T JW-E310 Homo sapiens (Human)
α2-纤溶酶抑制因子(α2PI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alpha-2-Plasmin Inhibitor (a2PI) 48T/96T JW-E311 Homo sapiens (Human)
泛素(Ub)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ubiquitin (Ub) 48T/96T JW-E312 Homo sapiens (Human)
半乳糖苷酶β(GLβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Galactosidase Beta (GLb) 48T/96T JW-E313 Homo sapiens (Human)
脱氧核糖核酸酶Ⅰ样2(DNASE1L2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Deoxyribonuclease I Like Protein 2 (DNASE1L2) 48T/96T JW-E314 Homo sapiens (Human)
谷丙转氨酶(ALT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alanine Aminotransferase (ALT) 48T/96T JW-E315 Mus musculus (Mouse)
丙酮酸激酶(PK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pyruvate Kinase, Liver And RBC (PK) 48T/96T JW-E316 Homo sapiens (Human)
补体1抑制因子(C1INH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complement 1 Inhibitor (C1INH) 48T/96T JW-E317 Homo sapiens (Human)
补体成分3a受体1(C3aR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complement Component 3a Receptor 1 (C3aR1) 48T/96T JW-E318 Homo sapiens (Human)
前列腺素F受体(FP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Prostaglandin F Receptor (FP) 48T/96T JW-E319 Homo sapiens (Human)
α-黑色素细胞刺激素(αMSH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alpha-Melanocyte Stimulating Hormone (aMSH) 48T/96T JW-E320 Homo sapiens (Human)
雄烯二醇(AED)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Androstenediol (AED) 48T/96T JW-E321 General
对氧磷酶1(PON1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Paraoxonase 1 (PON1) 48T/96T JW-E322 Homo sapiens (Human)
胱天蛋白酶2(CASP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Caspase 2 (CASP2) 48T/96T JW-E323 Homo sapiens (Human)
着丝粒蛋白E(CENPE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Centromere Protein E (CENPE) 48T/96T JW-E324 人胰岛素样生长因子2(IGF-2)elisa试剂盒Homo sapiens (Human)
甘胆酸(CG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cholyglycine (CG) 48T/96T JW-E325 Homo sapiens (Human)
肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Heparin Cofactor II (HCII) 48T/96T JW-E326 Homo sapiens (Human)
公司提醒:为了您获得更理想的人胰岛素样生长因子2(IGF-2)elisa试剂盒实验结果,请精确配制标准品及工作液A和B,以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差;酶标板在温育时应加膜覆盖以避免液体蒸发;检测液A和检测液B,以及底物溶液在使用前,应置于37℃温育30分钟待用;洗板后应尽快进行下一步操作,避免酶标板长时间处于干燥状态。
规格96T/48T
存储条件:2-8℃ 避光储存
有效期:6个月(可接受预定)
待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等。
检测种属:人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠elisa检测试剂盒等种属。
适用范围:此试剂盒仅用于科研实验,禁用于临床
elisa试剂盒,elisa检测试剂盒,进口elisa试剂盒-上海润裕生物方法类型和操作步骤:
elisa可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂:①固相的抗原或抗体,②酶标记的抗原或抗体,③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计出各种不同类型的检测方法。
(一)双抗体夹心法
双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法,操作步骤如下:
(1)将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体:洗涤除去未结合的抗体及杂质。
(2)加受检标本:使之与固相抗体接触反应一段时间,让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合,形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。
(3)加酶标抗体:使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。
(4)加底物:夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量。
根据同样原理,将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物,即可用双抗原夹心法测定标本中的抗体。
(二)间接法测抗体
间接法是检测抗体最常用的方法,其原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体,故称为间接法。操作步骤如下:
(1)将特异性抗原与固相载体连接,形成固相抗原:洗涤除去未结合的抗原及杂质。
(2)加稀释的受检血清:其中的特异抗体与抗原结合,形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后,固相载体上只留下特异性抗体。其他免疫球蛋白及血清中的杂质由于不能与固相抗原结合,在洗涤过程中被洗去。
(3)加酶标抗抗体:与固相复合物中的抗体结合,从而使该抗体间接地标记上酶。洗涤后,固相载体上的酶量就代表特异性抗体的量。例如欲测人对某种疾病的抗体,可用酶标羊抗人IgG抗体。
(4)加底物显色:颜色深度代表标本中受检抗体的量。
本法只要更换不同的固相抗原,可以用一种酶标抗抗体检测各种与抗原相应的抗体。
(三)竞争法
竞争法可用于测定抗原,也可用于测定抗体。以测定抗原为例,受检抗原和酶标抗原竞争与固相抗体结合,因此结合于固相的酶标抗原量与受检抗原的量呈反比。操作步骤如下:
(1)将特异抗体与固相载体连接,形成固相抗体。洗涤。
(2)待测管中加受检标本和一定量酶标抗原的混合溶液,使之与固相抗体反应。如受检标本中无抗原,则酶标抗原能顺利地与固相抗体结合。如受检标本中含有抗原,则与酶标抗原以同样的机会与固相抗体结合,竞争性地占去了酶标抗原与固相载体结合的机会,使酶标抗原与固相载体的结合量减少。参考管中只加酶标抗原,保温后,酶标抗原与固相抗体的结合可达最充分的量。洗涤。 (3)加底物显色:参考管中由于结合的酶标抗原最多,故颜色最深。参考管颜色深度与待测管颜色深度之差,代表受检标本抗原的量。待测管颜色越淡,表示标本中抗原含量越多。
凡购买elisa试剂盒,elisa检测试剂盒,进口elisa试剂盒-上海润裕生物等相关elisa试剂盒产品,我司拥有一流的技术团队,完善的售后服务体系。公心语生物公司提供免费代测,需要代测单位的试验材料和试剂等均须采用特快专递形式邮寄,有低温要求的、固定要求的,按低温保存、固定防碎方法运输,以确保实验物品的安全可靠。如数量巨大,我司可以让专业人员前往提取。详情请与我司销售人员联系。
编号 | 中文名称 | 英文名称 | 规格 |
F2304-A | 人血管生成素1(ANG-1)elisa试剂盒 | Human Angiopoietin 1,ANG-1 elisa Kit | 48T |
人血管生成素1(ANG-1)elisa试剂盒广泛应用在免疫学检验的各领域中,我们来介绍一下更简便的操作说明
1、人血管生成素1(ANG-1)elisa试剂盒操作方法一用于检测未知抗原的双抗体夹心法:(1).包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。 (2).加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。 (3).加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。 (4).加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。 (5).终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。 (6).结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
2、人血管生成素1(ANG-1)elisa试剂盒操作方法二:用于检测未知抗体的间接法: (1).用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。 (2).加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)(3).于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,最后一遍用DDW洗涤。 (4).于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟 (5).于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml (6).可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。 ELISA是一种敏感性高、特异性强、重复性好的实验诊断方法,由于其试剂稳定、易保存、操作简便、结果判断较客观等因素,以及既适宜于大规模筛查试验又可以用于少量标本的检测,既可以做定性试验也可以做定量分析等优点,已广泛应用于微生物学、寄生虫学、肿瘤学和细胞因子等领域。
3、临床标本的收集和保存 用于ELISA测定的临床标本最为常用的是血清(浆),有时因为特定的检测目的,也用到唾液、脑脊液、尿液、粪便等标本。目前临床上使用血清标本测定的标志物一般有传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物、激素、特种蛋白、细胞因子和治疗药物等。对用于激素和治疗药物测定的血清标本的收集,要注意收集时间甚或体位有可能会对测定结果产生影响。如可的松在早晨4~6点之间,会有一峰值出现:生长激素、促黄体激素(LH)和促卵泡激素(FSH)均以阵发性方式释放,因此,在测定此类激素时,有必要在密切相连的时间间隔内采取数份血样本,以其中间值为测定值。又如当从卧位变为站立位时,血清中肾素活性将出现明显增高。再如治疗药物的检测,应根据药代动力学选择服药后的最适时间抽血检测。用于传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物和特种蛋白等的检测的血清标本的收集则没有时间和体位方面的影响,只是在处理和保存方面要考虑。
(1)要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有类似过氧化物的活性,因此,在以HRP为标记酶的ELISA测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很容易在温育过程中吸附于固相,从而与后面加入的HRP底物反应显色。(2)样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染,一则细菌的生长,其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用;二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。(3)血清标本如是以无菌操作分离,则可以在2~8℃下保存一周,如为有菌操作,则建议冰冻保存。样本的长时间保存,应在-70℃以下。(4)冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用,从而引起假阴性结果。此外,冻融标本的混匀亦应注意,不要进行剧烈振荡,反复颠倒混匀即可。(5)标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时,应离心沉淀后取上清检测。
4、试剂准备 在临床实验室,对试剂准备一般不太注意,通常的做法是,在实验时将试剂从冰箱中拿出来即用,而忽略了这种做法有可能影响后面温育时间不够的问题,其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性。因此在ELISA测定中试剂的准备最为关键的是,在实验开始前,将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20分钟以上后,再进行测定,以使试剂盒在使用前与室温平衡。这样做的目的,主要是为了在后面的温育反应步骤中,能使反应微孔内的温度能较快地达到所要求的高度,以满足测定要求。其次,目前的商品ELISA试剂盒中的洗板液均需在实验室使用时对所提供的浓缩液稀释配制,因此稀释时所用的蒸馏水或去离子水应保证质量。此外,当试剂盒以OPD为底物时,则底物溶液应在反应显色前临时配制。
在现在的ELISA商品试剂盒中,血清样本的加入几乎是唯一的要使用微量加样器加入样本的步骤。使用微量加样器加样必须注意的关键点是:加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡。加样太快,无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。试剂的加入在国产试剂盒中基本上均是从滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出现重复滴加或加在两孔之间的现象,这样就会在孔内的非包被区出现非特异吸附,从而引起非特异显色。所以,有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性,下次测定为阴性,往往就是上述加样及试剂的错误所致。
四、温育温育是ELISA测定中影响测定成败最为关键的一个因素。ELISA作为一种固相免疫测定,抗原抗体的结合反应在固相上进行,要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合,必须在一定的温度条件下反应一定的时间。温育所需时间与温度成反比,即温度越高,则所需时间相对较短。最为常用的温育温度有37℃和室温,其次是43℃和2~8℃。温育这一步是临床ELISA测定中最容易出现问题的步骤。通常目前国内ELISA商品试剂盒的反应温育时间为37℃ 30分钟~1小时,进口ELISA试剂盒则通常为37℃ 1~2小时才能有较完全的结合,低于1小时,可能会影响测定下限。因此,关于温育,在实际测定操作中一定要注意以下几点:要保证在设定的温度下有足够的反应时间。一般来说,加完样本和/或反应试剂后,将微孔板从室温拿至水浴箱或温箱中时,孔内温度从室温升至37℃,需要一定的时间,尤其是在室温比较低以及非水浴的状态下,这段升温时间可能还比较长,而在临床实验室中,很少有人注意这个问题,通常是将微孔板一放入温箱即开始计时,这样就很容易造成实际测定中温育时间不够,弱阳性样本测不出来的问题。曾有一地处南方的血站同行提出了一个问题,就是在每一年的冬季总有那么一个多月的时间,在做HBsAg测定的室内质控中,测定由卫生部临床检验中心供应的1 ng/ml弱阳性样本时,总是测不出来,不知原因为何?这可能就与南方冬天室内温度较低有关,此时微孔板转入温箱后37℃温育时间不够,以致弱阳性样本测定为阴性。因此,为保证37℃下足够的温育时间,临床实验室可自行确定本实验室不同季节(不同室温下)微孔板从室温拿至温箱后需要多长时间孔内温度才能达到37℃,从而适当延长板条在温箱中的放置时间。具体的做法是,用一小温度计放置板孔反应溶液中测量观察即可。
EK-Bioscience
Biotechnology Co., Ltd. Shanghai enzyme research
This kit is for in vitro research use, not for clinical diagnosis!
(本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)
人胰岛素(INS)酶联免疫分析试剂盒
Human(INS)ELISA Kit
CAS.NO:EK-H11985
声明:尊敬的客户,感谢您选用本公司的人胰岛素(INS)elisa试剂盒96T产品。本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中胰岛素(INS)含量。使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分!如有疑问,请及时联系我们。
参数规格
中文名称 | English name | 96T/48T 含量 | 保存 |
ELISA酶标板(可拆卸) | Microelisa stripplate | 8×12 / 8×6 * | 2-8℃ |
标准品(32mU/L) | Standard | 1瓶 0.5ml * | 2-8℃ |
标准品稀释液 | Standard diluent | 1 瓶 1.5ml * | 2-8℃ |
酶标试剂 | HRP-Conjugate reagent | 1 瓶 6 ml/3ml * | 2-8℃ |
样品稀释液 | Sample diluent | 1 瓶 6 ml/3ml * | 2-8℃ |
显色剂 A 液 | Chromogen Solution A | 1 瓶 6 ml/3ml * | 2-8℃ |
显色剂 B 液 | Chromogen Solution B | 1 瓶 6 ml/3ml * | 2-8℃ |
终止液 | Stop Solution | 1 瓶 6 ml/3ml * | 2-8℃ |
浓缩洗涤液 | wash solution | 1 瓶20ml * | 2-8℃ |
说明书 | Instruction | 1份 * |
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封板膜 | Closure plate membrane | 2 片 * |
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密封袋 | Sealed bags | 1个 * |
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产品用途
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人胰岛素(INS)水平。用纯化的人胰岛素(INS)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入胰岛素(INS),再与HRP 标记的胰岛素(INS)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的胰岛素(INS)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人胰岛素(INS)浓度。
标本要求
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
5. 培养细胞:检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
7. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
8.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
试验所需自备物品:
1. 酶标仪(450nm波长滤光片)
2. 高精度移液器,EP管及一次性吸头
3. 37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
4. 吸水纸5.人胰岛素(INS)elisa试剂盒96T
操作流程
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
16mU/L | 5号标准品 | 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
8mU/L | 4号标准品 | 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
4mU/L | 3号标准品 | 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
2mU/L | 2号标准品 | 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
1mU/L | 1号标准品 | 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍(48T 的20 倍)浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
8. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
实验目的、灵敏度、检测范围和重复性:
●实验目的:测定人血清样本中胰岛素(INS)含量。
●灵敏度:最小可测 0.3mU/L。
●检测范围 0.5mU/L – 16mU/L。
●重复性:板内,板间变异系数均<10%。
问题分析
若实验效果不好,请及时对显色结果拍照,保留所用板条及未使用试剂,并妥善保存,然后联系我公司技术支持为您解决问题。同时您也可以参考以下资料:
问题描述 | 可能原因 | 相应对策 |
标准曲线梯 度差 | 吸液或加液不准 | 检查移液器及吸头 |
标准品稀释不正确 | 溶解标准品稍微旋转瓶身,轻轻混匀使粉末完全溶解 | |
洗涤不完全 | 保证洗涤时间和洗涤次数及每孔的加液量 | |
显色很弱或 无色
| 孵育时间太短 | 保证充足的孵育时间 |
实验温度不正确 | 使用推荐的实验温度 | |
试剂体积不够或漏加 | 检查吸液及加液过程,保证所有试剂按顺序足量添加 | |
稀释不正确 | ||
读数数值低 | 酶标仪设置不正确
| 在酶标仪上检查波长及滤光片设置 |
提前打开酶标仪预热 | ||
变异系数大 | 加液不正确 | 检查加液情况 |
背景值高
| 检测抗体的工作浓度 | 使用推荐的稀释倍数 |
酶标板洗涤不完全 | 重新阅读操作手册,保证清洗完全;如果用自动洗板机,请检查所有的出口是否有堵塞 | |
洗液有污染 | 配制新鲜的洗液 | |
灵敏度低 | ELISA 试剂盒保存 | 按说明书要求保存相关试剂 |
读数前未终止 | OD 读数前应在每孔中加入终止液 |
声明
1. 限于现有条件及科学技术水平,尚不能对所有原料进行全面的鉴定分析,本产品可能存在一定的质量技术风险。
2. 最终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关,请务必准备充足的待测样品。
3. 只有全部使用人胰岛素(INS)ELISA试剂盒96T内的试剂才能保证检测效果,不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守本实验说明才会得到最佳的检测结果。
4. 有效期:6 个月。
代测服务
凡购买我公司试剂盒,均可享受免费代测服务!
联系时请提供产品货号,以便我们更高效地为您服务。 谢谢!
This kit is for in vitro research use, not for clinical diagnosis!
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被大鼠阿立新A(OrexinA)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠阿立新A(OrexinA)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
操作注意事项
1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 标准品稀释液即可视为阴性对照或者空白;预处理后的样本无需稀释,直接取10μL加样即可。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成
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微孔酶标板 | | | |
标准品(800 pg/mL) | | | |
标准品稀释液 | | | |
样本稀释液 | | | |
检测抗体-HRP | | | |
20×洗涤缓冲液 | | | |
底物A | | | |
底物B | | | |
终止液 | | | |
封板膜 | | | |
说明书 | | | |
自封袋 | | | |
注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:800、400、200、100、50、25 pg/mL
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
操作步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;
4. 随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果判断
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
试剂盒性能
1. 性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2. 灵敏度:检测浓度小于10 pg/mL。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 期:6个月
免责声明
1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
FOR RESEARCH USE ONLY.
NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES.
Intended use
This OrexinA ELISA kit is intended Laboratory for Research use only and is not for use in diagnostic or therapeutic procedures. The Stop Solution changes the color from blue to yellow and the intensity of the color is measured at 450 nm using a spectrophotometer. In order to measure the concentration of OrexinA in the sample, this OrexinA ELISA Kit includes a set of calibration standards. The calibration standards are assayed at the same time as the samples and allow the operator to produce a standard curve of Optical Density versus OrexinA concentration. The concentration of OrexinA in the samples is then determined by comparing the O.D. of the samples to the standard curve.
Sample collection and storages
Serum - Use a serum separator tube and allow samples to clot for 30 minutes before centrifugation for 10 minutes at approximately 3000×g. Remove serum and assay immediately or aliquot and store samples at -20℃ or -80℃.Avoid repeated freeze-thaw cycles
Plasma - Collect plasma using EDTA or heparin as an anticoagulant. Centrifuge samples for 30 minutes at 3000×g at 2-8℃ within 30 minutes of collection. Store samples at -20℃or -80℃. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
Cell culture supernates and other biological fluids - Remove particulates by centrifugation and assay immediately or aliquot and store samples at -20℃or -80℃. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
Note: The samples shoule be centrifugated dequately and no hemolysis or granule was allowed.
Materials required but not supplied
1. Standard microplate reader(450nm)
2. Precision pipettes and Disposable pipette tips.
3. 37 ℃ incubator
Precautions
1. Do not substitute reagents from one kit to another. Standard, conjugate and microplates are matched for optimal performance. Use only the reagents supplied by manufacturer.
2. Do not remove microplate from the storage bag until needed. Unused strips should be stored at 2-8°C in their pouch with the desiccant provided.
3. Mix all reagents before using.
Remove all kit reagents from refrigerator and allow them to reach room temperature ( 20-25°C)
Materials supplied
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Note: Standard diluent with Standard diluent concentration was followed by:
800、400、200、100、50、25 pg/mL
Reagent preparation
Assay procedure
1. Prepare all reagents before starting assay procedure. It is recommended that all Standards and Samples be added in duplicate to the Microelisa Stripplate.
2. Add standard: Set Standard wells, testing sample wells. Add standard 50μl to standard well.
3. Add Sample: Add testing sample 10μl Then add sample diluent 40μl to testing sample well; Blank well doesn’t add anyting.
4. Add 100μl of HRP-conjugate reagent to each well, cover with an adhesive strip and incubate for 60 minutes at 37°C.
5. Aspirate each well and wash, repeating the process four times for a total of five washes. Wash by filling each well with Wash Solution (400μl) using a squirt bottle, manifold dispenser or autowasher. Complete removal of liquid at each step is essential to good performance. After the last wash, remove any remaining Wash Solution by aspirating or decanting. Invert the plate and blot it against clean paper towels.
6. Add chromogen solution A 50μl and chromogen solution B 50μl to each well. Gently mix and incubate for 15 minutes at 37°C. Protect from light.
7. Add 50μl Stop Solution to each well. The color in the wells should change from blue to yellow. If the color in the wells is green or the color change does not
appear uniform, gently tap the plate to ensure thorough mixing.
8. Read the Optical Density (O.D.) at 450 nm using a microtiter plate reader within 15 minutes.
Calculation of results
1. This standard curve is used to determine the amount in an unknown sample. The standard curve is generated by plotting the average O.D. (450 nm) obtained for each of the six standard concentrations on the vertical (Y) axis versus the corresponding concentration on the horizontal (X) axis.
2. First, calculate the mean O.D. value for each standard and sample. All O.D. values, are subtracted by the mean value of the zero standard before result interpretation. Construct the standard curve using graph paper or statistical software.
3. To determine the amount in each sample, first locate the O.D. value on the Y-axis and extend a horizontal line to the standard curve. At the point of intersection, draw a vertical line to the X-axis and read the corresponding concentration.
4. Any variation in operator, pipetting and washing technique, incubation time or temperature, and kit age can cause variation in result. Each user should obtain their own standard curve.
5. The sensitivity by this assay is 10 pg/mL.
6. Standard curve
Storage: 2-8℃.
validity: six months.