l 本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)的含量。
l 期:6个月
l 保存条件:2-8℃
l 本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断
实验原理
试剂盒采用间接法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)捕获抗原的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样本处理及要求
1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。注:标本溶血会影响检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
标本处理
1. 本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本。
2. 实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。
3. 若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其性,并注意留存样本。
4. 使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。
5. 若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况。
6. 某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出。
7. 建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。
需要而未提供的试剂和器材
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水
试剂盒组成
名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
微孔酶标板 | 8孔×12条 | 8孔×6条 | 无 |
标准品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 无 |
样本稀释液 | 6mL | 3mL | 无 |
检测抗体-HRP | 10mL | 5mL | 无 |
20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
底物A | 6mL | 3mL | 无 |
底物B | 6mL | 3mL | 无 |
终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
备注:
1. 标准品浓度依次为:8、4、2、1、0.5、0 ng/mL
2. 经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过最大标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。
注意事项
1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2. 洗板不正确可以导致不的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6. 在储存和温育时避免强光直接照射。
7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9. 不能使用过期产品。
10. 如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
试剂准备
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
操作步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
实验结果计算
以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。
试剂盒性能
1. 检测范围:0.25 ng/mL – 8 ng/mL。
2. 灵敏度:检测浓度小于0.1 ng/mL。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 。
说明
1. 由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行的鉴定与分析,本产品可能存在一定的质量技术风险。
2. 最终的实验结果与试剂的性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关,请务必准备充足的标本备份。
3. 不同批次的同一产品可能会有少许差别,如:检测限、灵敏度以及显色时间等,请依据试剂盒内说明书进行实验操作,网站电子版说明书仅作参考。
4. 只有全部使用本试剂盒配套试剂才能检测效果,不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守本试剂盒的实验说明才会得到的检测结果。
问题解答
若实验效果不好,请及时对显色结果拍照,保留所用板条及未使用试剂,并妥善保存,然后联系我公司技术支持为您解决问题。同时您也可以参考以下资料:
问题 | 可能原因 | 解决方案 |
标准曲线差 | 吸取及洗涤不充分 | 充分的吸取及洗涤 |
移液不精确 | 检查和校正移液器 | |
精密度低 | 洗涤不充分 | 按说明书要求充分洗涤和浸泡 |
混匀不充分和吸取试剂不足 | 充分混匀和吸取试剂 | |
重复利用吸头、容器和覆膜 | 使用加样器要更换新的吸头、使用新的容器和覆膜 | |
加样不精确 | 检查和校正移液器 | |
O.D值低 | 每孔加的试剂量不精确 | 校正移液器,精确加入试剂 |
温育时间不正确 | 充足的温育时间 | |
温育温度不正确 | 试剂要平衡至室温并的温育温度 | |
酶标记物或底物失效 | 通过混合酶标记物和底物,颜色应迅速显现来检查 | |
没有加入终止液 | 按照说明书实验操作步骤加入终止液 | |
超出读数时间读数 | 在说明书推荐的读数时间内读数 | |
样本值 | 不正确的样本储存方式 | 正确储存样本,使用新鲜样本进行实验 |
不正确的样本收集和处理方法 | 采取正确的样本收集和处理方法 | |
待测物质在样本中含量低 | 使用新鲜样本,重复实验 |
产品名称:大鼠elisa试剂盒
产品规格:48T/96T
检测方法: ELISA酶联免疫法
说 明 书:随货发送,也可直接联系在线销售索取
测试种属:人、大小鼠、豚鼠、兔子、牛、羊、猪、鸡、鸭elisa试剂盒等种属
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
试剂盒保存及有效期:2-8℃,避光保存:6个月。
产品产地:进口/国产
产品库存:
品牌:自主研发/进口原装
产品价格:价格优惠,欢迎来电洽谈!
试剂盒使用范围:仅供科研检测,不得用于临床.
产品价格:价格优惠,欢迎来电洽谈!
人肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒定性定量检测一步到位,可同时大批量完成多种属的检测工作,而且一天之内可以检查几百甚至上千份标本,正规专业的我们,一定能帮您,将实验做得更好,更精确。试验过程中,如有任何疑问都可和我们联系,无论是售前、售中、售后我们都将始终如一,将优质服务进行到底。
供应商:上海繁旌生物科技有限公司
上海繁旌生物ELISA试剂盒独特优势:
1、采用全进口原料和抗体:高效、灵敏、特异,严格引进国际技术标准进行批量生产。
2、先进的优化方案:重复性高,可靠性。
3、技术服务:专业,及时,耐心。
4、现货供应:江浙沪隔天到货,外地3-5天到货。
人肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒技术原理:
(1). 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
(2). 结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。
(3). 酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。
(4). 受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。
(5). 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重复性好。以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。
人肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒操作步骤:
1、包被过程(注意设置空白对照,阴性对照):
将所用抗原用包被稀释液稀释到适当浓度(一般所需抗原包被量为每孔20-200μg),每孔抗原加入100μl,置37℃,4h,或4℃,24h;弃去孔中液体.(为避免蒸发,板上应加盖或将板平放在底部有湿纱布的金属湿盒中)
2、封闭酶标反应孔:
5%小牛血清置37℃封闭40min.封闭时将封闭液加满各反应孔,并去除各孔中的气泡,封闭结束后用洗涤液满孔洗涤3遍,每遍3min.
洗涤方法:吸干孔内反应液,将洗涤液注满板孔,放置2min略作摇动,吸干孔内液,倾去液体后在吸水纸上拍干
洗涤次数3次
3、加入待检测样品(建立合适的浓度梯度):
检测时一般采用1:50-1:400的稀释度,应采用较大稀释体积进行,一般保证样品吸取量>20μl.
将稀释好的样品加入酶标反应孔中,每样品至少加双孔,每孔100μl,置于37℃,40-60min.用洗涤液满孔洗涤3遍,每遍3min.
4、加入酶标抗体:
酶标抗体:根据酶结合物提供商提供的参考工作稀释度进行.37℃,30-60min之间.短于30min往往结果不稳定.每孔加100μl.洗涤同前.
5、加入底物液(现用现配):
首选TMB-过氧化氢尿素溶液,OPD-过氧化氢底物液系统次之.
底物加入量:每孔100μl,置37℃避光放置3-5分钟,加入终止液显色.
6、终止反应:
每孔加入终止液50μl终止反应,于20min内测定实验结果.
7、结果判断:
OPD显色后采用492nm波长,TMB反应产物检测需要450nm波长.检测时一定要首先进行空白孔系统调零.用测定标本孔的吸收值与一组阴性标本测定孔平均值的比值(P/N)表示,当P/N大于2时作为抗体的效价.(数值的大小依具体检测要求而定.)
人肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒经过严格交叉反应和干扰测试及稳定性试验;明确的敏感度;针对所有样品类型达到的性能;广泛的检测范围可以满足大多数检测要求;完善的售后服务和免费的技术支持免去您的后顾之忧,凡购买试剂盒者都可享受我公司相应折扣优惠,如有需要,可来电咨询购买!
关于ELISA试剂盒
ELISA试剂盒在国内有许多种叫法,例如:ELISA检测试剂盒、ELISA Kit、酶联免疫试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒、酶联免疫分析试剂盒、酶免试剂盒等,比较常见的叫法是ELISA检测试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒等。
ELISA试剂盒自从60-70年代问世以来,得到全世界科研工作者的认可及推崇,在欧美及中国获得很大的推广,尤其是国内生化领域的长足发展。
Elisa生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。ELISA检测试剂盒适用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗体ELISA检测。
免疫测定技术的基础在于抗原抗体之间的特异结合反应,所以任何优质的诊断试剂离不开优质的原料,如抗原抗体,酶等。以前用于免疫测定的抗原通常为各种纯化抗原,而抗体则为纯化抗原免疫动物后获得的多克隆抗体和使用杂交瘤技术得到的单克隆抗体,而抗原或抗体的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。近年来,随着分子生物学的发展,使用基因工程方法制备各种特殊的抗原或抗体及其酶结合物等免疫测定试剂几成为现实的新一代试剂,各种新型使用的测定方法也不断出现。
HBsAg试剂特点(检测模式:临床抗体夹心法):包被抗体为山羊多抗。多抗具有高亲和性和对抗原各种表位的反应性。酶表抗体为与HBsAg有不同结合位点的鼠复合单位,可测得HBsAg变异样品,提高检测的特异性(99.98%)提高检测的灵敏度,应用Parl Ehrich 学说(PEI)HBsAg标准品,对ad标准品的灵敏度为0.05ng/ml对ay标准品灵敏度为0.025ng/ml
ELISA检测试剂盒应用定性夹心免疫检测技术,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条,这些多肽是中国型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很强的肽段,分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或标准品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗体,这些抗体就会与HEV 的多肽抗原结合,并固定在上面,洗板除去其它非特异性抗体和样品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根过氧化物酶)酶结合物,经第二次孵育后,酶结合物就会与第一次孵育结合上的HEV IgM抗体相结合,洗板除去未结合的酶结合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育时会发生酶-底物反应,只有那些含有HEV IgM抗体和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化,加入硫酸溶液终止酶和底物间的反应,并在波长: 450nm处测量O.D.值,按照本HEV IgM抗体elisa试剂盒的测试标准, O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性。
LISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。
然而,影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点。
特点:一、高效、灵敏、特异的抗体; 二、稳定的重复性和可靠性; 三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体; 四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型; 五、节省实验经费。
elisa试剂盒回收率是反应待测物在样品分析过程中的损失的程度,损失越少,回收率越高,如果作标液1PPM,就是1毫克/升,而作出标准数据为0.99毫克/升,就是说你的回收率是99%,这个与真实成分有密切的关系,说明方法的准确度。比如水中总无机氯含量测定,样品水中含有无机氯20mg/L,取100mL被测水样品,加入0.1mL浓度为10mg/mL的含无机氯标准样品,测定时忽略体积变化,如果测定出样品中无机氯为2.98mg/L,则认为回收率为99%。
安全性
1. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
4. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
5. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
6. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
7. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
8. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
9. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
10. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
11. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
12. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
elisa试剂盒测试要求
做好对照
正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。
实验条件的选择
在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
检测范围和灵敏度不同,用量少时,可使用分装,前期是它的长久性不是很好。
试剂盒的标准曲线最高点OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。
试剂盒的标准曲线相关系数R≥0.98。
试剂盒重复性好,板内、板间变异系数均<9 %。
试剂的组份都多给20%的富余量,确保完成48/96孔的检测,避免分次检测可能造成试剂量不足的情况。
检测抗体及酶结合物的稀释度合适(均为1:30), 方便试验操作者准确地做稀释工作,保证实验结果的重复性
ELISA法是免疫诊断中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定,根据已经使用的结果,认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查,而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此,也适合于血清流行病学调查。本法不仅可以用来测定抗体,而且也可用于测定体液中的循环抗原,所以也是一种早期诊断的良好方法。因此ELISA法在生物医学各领域的应用范围日益扩大
产品名称:人肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa试剂盒英文名称:
Human Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA KIT |
人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4(TRAIL-R4)ELISA试剂盒 |
人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3(TRAIL-R3)ELISA试剂盒 |
人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(TRAIL-R1)ELISA试剂盒 |
人肿瘤坏死因子β(TNF-β)ELISA试剂盒 |
人肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA试剂盒 |
人肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA试剂盒 |
人血管生成素1(ANG-1)elisa试剂盒是全世界科研界较认可的检测方式,英文名称: Human Angiopoietin 1,ANG-1 elisa Kit,一种简易操作,敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。在我 们国家的科研单位、高校、医疗实验室都应用的比较成熟。
人血管生成素1(ANG-1)elisa试剂盒技术流程ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活 性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记 的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关 ,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。然而,影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点。
主要优点1、简易操作、高效、灵敏、特异的抗体;2、稳定的重复性和可靠性;3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;4、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;5、节省实验经费。
使用方法1、 血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。2、 血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、 细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。5、 保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应 在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。操作步骤1:双抗体夹心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗 涤,下同)。2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于 450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。操作步骤2:间接法1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜;2.次日洗涤3次;3.加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤;4.(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml;5.37℃孵育30-60分钟,洗涤;6.’最后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。
标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6 个月
【规格】48T/96T
【所需标本】血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等.
【库存状态】现货供应,订单生成,立即安排发货。
【使用范围】仅供科研使用,不得用于临床。
【产品用途】用于测定人血清、血浆、组织及相关液体样本中的含量或活性。
上海润裕生物-中国老牌ELISA试剂盒供应商,免费代测,从标本收集、保存、预试验、实验、数据分析等全实验过程提供完整的技术指导。
服务承诺:工作时间内免费代测,免费技术咨询和指导。我们的销售工程师经过专业培训的,将为您提供满意的产品和真诚的服务。
人Smad同源物3(Smad3)elisa试剂盒厂家上海润裕生物科技有限公司有专业的技术人员为您提供专业的操作问题分析与解答。包括售前的标本收集,使用过程中不清楚的地方,实验结束后的数据分析,有任何疑问,我们都会即时与您沟通。
我司ELISA试剂盒(酶联免疫分析试剂盒)提供免费代测服务,欢迎来电订购。我司专业供应各种属ELISA试剂盒产品,主要包括:人、大鼠、小鼠、羊、犬、猴、猪、牛、兔、豚鼠、植物ELISA试剂盒等ELISA试剂盒产品。如果您对我司其他产品感兴趣可通过以下方式咨询订购:
(1)、来电(免费咨询电话021-31123600)向我司直接咨询及订购
(2)、QQ:1369357859进行联系
人Smad同源物3(Smad3)elisa试剂盒厂家组成:
试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存
说明书 1份 1份
封板膜 2片(48) 2片(96)
密封袋 1个 1个
酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
标准品 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
标准品稀释液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
链霉亲和素-HRP 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
生物素标记抗体 0.5ml×1瓶 1 ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
浓缩洗涤液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存
人Smad同源物3(Smad3)elisa试剂盒厂家样品收集、处理及保存方法:
1)血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2)血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3)细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4)组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
5)保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
人Smad同源物3(Smad3)elisa试剂盒厂家我司ELISA试剂盒采用原装进口抗体,高品质Elisa试剂盒,专业的Elisa试剂盒厂家,品质保证,免费代测。其他相关产品欢迎选购:
兔子胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA检测试剂盒 规格:96T/48T 免费代测
人缺血修饰白蛋白(IMA)ELISA检测试剂盒 规格:96T/48T 免费代测
鸡1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA检测试剂盒 规格:96T/48T 免费代测
小鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA检测试剂盒 规格:96T/48T 免费代测
小鼠脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA检测试剂盒 规格:96T/48T 免费代测
人登革热抗体(DF-Ab)ELISA检测试剂盒 规格:96T/48T 免费代测
猪黑色素瘤转移表面黏附分子(MMSAM)ELISA检测试剂盒 规格:96T/48T 免费代测
人类白细胞抗原A(HLA-A)ELISA检测试剂盒 规格:96T/48T 免费代测
人抗α-胞衬蛋白抗体IgG(α-Fodrin IgG)ELISA检测试剂盒 规格:96T/48T 免费代测
大鼠孕酮(P) ELISA 试剂盒 规格:96T/48T 免费代测
大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA检测试剂盒 规格:96T/48T 免费代测
人抗卵巢抗体(AOAb)ELISA检测试剂盒 规格:96T/48T 免费代测
猪转化生长因子β2(TGF-β2)ELISA检测试剂盒 规格:96T/48T 免费代测
人激动异构酶/细胞分裂素MB(CKMB)ELISA检测试剂盒 规格:96T/48T 免费代测
大鼠乙醇脱氢酶(ADH)ELISA检测试剂盒 规格:96T/48T 免费代测
人碱性磷酸酶(ALP)ELISA检测试剂盒 规格:96T/48T 免费代测
大鼠结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA检测试剂盒 规格:96T/48T 免费代测
人β位淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)ELISA检测试剂盒 规格:96T/48T 免费代测
人糖化白蛋白(GA)ELISA检测试剂盒 规格:96T/48T 免费代测
兔乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)ELISA检测试剂盒 规格:96T/48T 免费代测
小鼠甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)ELISA试剂盒说明书
大鼠热休克蛋白27(HSP-27)ELISA检测试剂盒 Rat heat shock protein 27,HSP-27 ELISA Kit( 现货供应,免费代测 )
我公司厂家直销各品牌大鼠热休克蛋白27(HSP-27)ELISA检测试剂盒 ,Elisa试剂盒产品质量保证,售后完善。欢迎来电询,公司提供免费代测服务,一周内出结果,保证质量,价格优,欢迎来电或咨询在线客服。
大鼠热休克蛋白27(HSP-27)ELISA检测试剂盒 公司更多高品质试剂产品!
大鼠横纹肌辅肌动蛋白α (sm Actinin-α )ELISA试剂盒 北京免费代测 大鼠横纹肌辅肌动蛋白α elisa检测试剂盒说明书 厂家 北京 大鼠可溶性CD14(sCD14)ELISA试剂盒 北京免费代测 大鼠可溶性CD14 elisa检测试剂盒说明书 厂家 北京 大鼠可溶性CD30配体(sCD30L)ELISA试剂盒 北京免费代测 大鼠可溶性CD30配体 elisa检测试剂盒说明书 厂家 北京 大鼠可溶性CD40配体(sCD40L)ELISA试剂盒 北京免费代测 大鼠可溶性CD40配体 elisa检测试剂盒说明书 厂家 北京 大鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA试剂盒 北京免费代测 大鼠可溶性CD86 elisa检测试剂盒说明书 厂家 北京 大鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)酶联免疫分析体(sEPCR)ELISA试剂盒 北京免费代测 大鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C受体 elisa检测试剂盒说明书 厂家 北京 大鼠可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒 北京免费代测 大鼠可溶性E选择素 elisa检测试剂盒说明书 厂家 北京
大鼠热休克蛋白27(HSP-27)ELISA检测试剂盒 本试剂仅供研究使用,如需详细资料请来电咨询北京华耐特生物科技有限公司。
本试剂盒仅供研究使用 有效期:6 个月1. 试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。2. 浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。3. 中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。4. 刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。5. 所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
关键词:大鼠热休克蛋白40,大鼠HSP-40 ELISA kit,北京试剂盒厂家
人末端补体复合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA试剂盒 >>现货供应
说明书:欢迎来电索取
Elisa试剂盒规格:96T/48T
价格:ELISA试剂盒为本公司最具优势的产品,价格优惠。
人末端补体复合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA试剂盒 提供免费代测服务,一周内出结果,保证质量。
Elisa试剂盒的原理 ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、牽9体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法(图a)、用于检测抗原的双抗体夹心法(图b)以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。
人末端补体复合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA试剂盒 更多高品质试剂产品:
人可溶性血纤蛋白单体复合物(SFMC)酶联免疫(Elisa)试剂盒报价|说明书96T/48T96T/48T,人ASA试剂盒说明书,抗骨骼肌抗体Elisa试剂盒价格,人ASA试剂盒说明书,抗骨骼肌抗体Elisa试剂盒价格人钙粘蛋白相关的神经受体1(CNR-1)Elisa试剂盒现货,Human cadherln-related neuronal receptor1,CNR-1 ELISA试剂盒,96T/48T人游离雌三醇说明书(FE3)Elisa检测试剂盒价格人Elisa-肌球蛋白轻链激酶试剂盒价格,(MLCK)试剂盒报价,96T/48T人TGF-β诱导早期基因1价格(TIEG1)说明书Elisa检测试剂盒 ,Human TGF-beta-inducible early response gene-1,TIEG1 ELISA试剂盒,96T/48T人IL-4低价格Elisa试剂盒说明书,96T/48T,HumanInterleukin4,IL-4ELISA试剂盒96T/48T,Chicken Immune RNA,Irna ELISA试剂盒,鸡免疫核糖核酸(Irna)酶联免疫(Elisa)试剂盒人多巴胺D1受体(D1R)Elisa试剂盒现货,Human Dopamine D1 receptor,D1R ELISA试剂盒,96T/48T小鼠白介素15说明书(IL-15)Elisa检测试剂盒价格小鼠SP-R价格Elisa试剂盒,96T/48T,MousesubstancePreceptor,SP-RELISA试剂盒大鼠Fbg价格Elisa试剂盒,96T/48T,RatFibrinogen,FbgELISA试剂盒牛肾上腺素价格(EPI)说明书Elisa检测试剂盒,Bovine Epinephrine/Adrenaline,EPI ELISA试剂盒 ,96T/48THuman Trichinella antibody ELISA试剂盒人旋毛虫抗体Elisa试剂盒96T/48T,小鼠骨钙素/骨谷氨酸蛋白 OT/BGP价格Elisa试剂盒现货,Mouse Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA试剂盒,96T/48T保质量,大鼠热休克蛋白90(HSP-90)Elisa试剂盒,Rat heat shock protein 90,hSP-90 ELISA试剂盒,96T/48T人可溶性白细胞分化抗原86价格(B7-2/sCD86)说明书Elisa检测试剂盒,Human soluble Cluster of differentiation 86,sCD86 ELISA试剂盒,96T/48TRat lipolysaccharide binding protein报价,LBP ELISA试剂盒价格,大鼠脂多糖结合蛋白报价LBP酶联免疫elisa试剂盒价格96T/48T小鼠巨噬细胞来源的趋化因子价格(MDC/CCL22)说明书Elisa检测试剂盒,Mouse Macrophage-Derived Chemokine,MDC ELISA试剂盒 ,96T/48T96T/48T,人BH3结构域凋亡诱导蛋白Elisa试剂盒,(Bid)Elisa试剂盒HumanBH3interactingdomaindeathagonist,BidELISA试剂盒96T/48T,小鼠Elisa-髓磷脂碱性蛋白试剂盒,(MBP)试剂盒Mouse myelin basic protein,MBP ELISA Kit大鼠神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)Elisa试剂盒价格,Rat glial fibrillary acidic protein,GFAP ELISA试剂盒,96T/48T保质量,小鼠胰高血糖素样肽1(GLP-1)Elisa试剂盒,Mouse ghcagons-like pepfide 1,GLP-1 ELISA试剂盒,96T/48T小鼠血管生成素受体Tie2说明书(ANG-R-Tie2)Elisa检测试剂盒价格
人IL-18 elisa试剂盒 相关试剂盒:人Lp-α ELISA试剂盒 Human lipoprotein α,Lp-α ELISA KIT人Cr ELISA试剂盒 Human Crosslaps,Cr ELISA KIT人CⅠCP ELISA试剂盒 Human cross-linked C-telopeptides of Type Ⅰ collagen,CⅠCP ELISA KIT人DPD ELISA试剂盒 Human deoxypyridinoline,DPD ELISA KIT人PY ELISA试剂盒 Human pyridinium crosslink/PyriLinks,PY ELISA KIT人OPN ELISA试剂盒 Human Osteopontin,OPN ELISA KIT人GABA ELISA试剂盒 Human Gamma-aminobutyric acid,GABA ELISA KIT 人SP-R ELISA试剂盒 Human substance P receptor,SP-R ELISA KIT人cGMP ELISA试剂盒 Human Cyclic guanosine monophosphate,cGMP ELISA KIT人Lp-PL-A2 ELISA试剂盒 Human lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PL-A2 ELISA KIT人EL ELISA试剂盒 Human Endothelial lipase,EL ELISA KIT人sm Actinin-α ELISA试剂盒 Human skeletal muscle Actinin-α,sm Actinin-α ELISA KIT人BMP-7 ELISA试剂盒 Human Bone morphogenetic protein 7,BMP-7 ELISA KIT达豪生物公司会以优质的产品,周到的服务来回馈于每一位新老客户,欢迎您来电订购我司“白介素系列ELISA试剂盒 ”。