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DNA电泳分子量标准(300-10000BP)添加DMSO或者使用修饰化的碱基以及使用LA-Taq来扩增PCR这些在我也都做过,不过都正如你所说,都是直接扩增基因组或cDNA.
而高GC含量影响反转录也是肯定的,因为高GC肯定容易形成复杂的二级结构,这些可以参见《分子克隆》。“我至今没有听说高GC含量会不利于逆转录,有一个证据就是在FMDV基因组RNA中有长达500bp的GC tail,DNA电泳分子量标准(300-10000BP)这个病毒的全基因组一样被测序出来”,但这并不能说明逆转录没有遇到麻烦,人家不会告诉你经过怎样的过程才测出来的。比如,对高GC含量的模板测序会比较困难吧,可是你到网上搜一搜,高GC含量的区域多的是,不然的话我也不无法预测我的基因5‘端有一个高GC区了是吗?我们不能因此就推出GC含量高不影响测序吧?我自己的例子也证明了高GC含量影响逆转录的,因为无论是筛库还是RACE,都是只能拿到此区域的相邻3’区,而可以肯定的是,所得到的一定不是全长,可见肯定是由于逆转录不过去。在搜一下文献,可以得出我的结论的。所以我现在最大的困难在于反转录,而不是PCR。
DNA电泳分子量标准(300-10000BP)首先检查一下你的基因片断大小以及回收量(应该不是很大,所以回收的量很可能太少),太小的片断不容易连,如果是这样建议使用好的感受态,或增大回收的量。其次看一下你回收时所用的紫外,波长是否小于314nm,如果是建议使用314以上的,并且操作时间尽量减短。第三,建议将回收产物普通Taq加A,不需回收,再连一次。最后,检查一下感受态。还有,如果T-easy存放时间过长,建议使用新的。
难度不出很大。DNA电泳分子量标准(300-10000BP)如果诱变的位点在基因中间,你可以用一个突变引物先引入突变;然后用这个突变体做一侧的引物(大引物),与另一个引物一起,以野生型基因为模板扩增。我们用这种方法做出来多个突变体。
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贮存/用途:酸染色剂及移码突变的诱变剂。吖啶橙是一种荧光色素,吖啶橙激发滤光片波长488nm。阻断滤光片波长515nm。吖啶橙与细胞中DNA和RNA结合量存在差别,可发出不同颜色的荧光(即着色特异性),这是由于DNA是个高度聚合物,吸收荧光物质的位置较少,发绿色荧光,而RNA聚合度低,能和荧光物质结合的位置多,故发红色荧光。
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E169-100G MES FREE ACID MONOHYDRATE MES缓冲液,一水 超纯级 100G 145224-94-8E169-100G分装 MES, FREE ACID, MONOHYDRATE MES缓冲液,一水 超纯级 E170-1kg TRICINE BUFFER TRICINE BUFFER 超纯级 E177-500ML EDTA, 0.5M STERILE SOLUTION EDTA, 0.5M无菌溶液, pH8.0 生物技术级 500ML E183-100G MES BUFFER ANHYDROUS MES缓冲液,无水 高纯级 100G 4432-31-9E183-250G MES BUFFER ANHYDROUS MES缓冲液,无水 高纯级 250G 4432-31-9E183-500G MES BUFFER ANHYDROUS MES缓冲液,无水 高纯级 500G 4432-31-9E190-5ML AGAROSE GEL LOADING DYE, 6X 6X核酸电泳上样缓冲液,15%菲可 超纯级 5ML E192-25G PATENT BLUE VF 酸性蓝 1(食品蓝 3) 超纯级 25G 129-17-9E193-4L ETHANOL ANHYDROUS, DENATURED 乙醇 生物技术级 4 L 64-17-5E193-500ML ETHANOL ANHYDROUS, DENATURED 乙醇 生物技术级 500ML 64-17-5E195-25ML PROTEINASE K, 20MG/ML SOLUTION 蛋白酶K,20mg/ml溶液 生物技术级 25ML E195-5ML PROTEINASE K, 20MG/ML SOLUTION 蛋白酶K,20mg/ml溶液 生物技术级 5ML E199-100ML 1M TRIS PH 8.0 Tris溶液 生物技术级 100ML E199-500ML 1M TRIS, PH 8.0 Tris溶液 生物技术级 500ML E203-5ML COMPLETE CELL LYSIS SOLUTION 即用型细菌细胞裂解液 生物技术级 5ML E213-25ML DNA SHEARED & DENATURED - 1ML 鱼精DNA, 已剪切/已变性 生物技术级 25ML E213-5ML DNA, SHEARED/DENATURED 20MG/ML 鱼精DNA, 已剪切/已变性 生物技术级 5ML E232-100G ADA BUFFER ADA缓冲液 高纯级 100G 26239-55-4E232-25G ADA BUFFER ADA缓冲液 高纯级 25G 26239-55-4
联系人:田女士 电话:18792836004 QQ1225152001
毛细管电泳是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分析技术,是分析科学中续液相色谱之后的又一重大进展,它使分析科学得以从微升水平进入纳升水平,并使单细胞乃至单分子分析成为可能,使困扰我们的生物大分子如蛋白质的分离分析也因此有了新的思路。该仪器可用于对有机化合物、无机离子、中性分子、手性化合物、蛋白质和多肽、DNA和核酸片段的分析。
性能参数
高压电源
l 输出电压: 35KV(可选30KV、-30KV),连续可调
l 输出电流: 0-1000 μA
l 电压输出精度: ≤0.5%
l 电流输出精度: ≤0.5%
l 时漂: ≤0.05%
l 温漂: ≤0.05%
紫外检测器
l 光源: 氘灯(标配),钨灯(选配)
l 波长范围: 190-700nm
l 波长精度: ±2nm
l 波长重复性: 0.4nm
l 基线噪声: 1.5×10-5Abs
l 基线漂移: 4×10-4Abs/h
l 检 测 限: ≤1×10-6g/ml
l 定量重复性: RSD%≤3.0%
l 定性重复性: RSD%≤1.3%
l 毛细管的最小长度:25cm
仪器特点
l 分离效率高,分析速度快,检测灵敏度高
l 试剂用量少,样品预处理简单
l 检测范围宽
l 信号输出: ±2.0V分16档可调
l 自动调零: 满量程自动调零
l 时间常数: 0.1/0.2/0.5/1.0/2.0/5.0/10.0s
l 可变波长选择,190-700nm连续
l 进样方式:电进样 0-35KV可调, 压差进样 0-220mm可调
l 冲洗方式:弹簧加压冲洗
l 液晶屏幕显示,轻触面板
赫尔纳贸易(大连)有限公司,2013年创建,德国公司,专业德国代购,价格有优势。
赫尔纳德国总部Heilna Trade GmbH,2013年德国注册(德国自有房产):
(1)德国公司:德国员工德国办公,向全欧洲厂家直接询价、代购。
(2)随母公司大连力迪流体的大货,每周从德国法兰克福空运大连。
(3)能保证:货源可靠、原装进口、价格低、货期短、有售后质保、技术支持。
(4)公司注册号:HRB 46967。税号:DE289560668。登记法院:奥芬巴赫市。
母公司大连力迪流体控制技术有限公司,1996年创建:
(1)7个欧洲高端阀门品牌:中国总代理,国内进口电磁阀专业代理商。
(2)国内进口木材干燥控制仪专业代理商。
(3) 21年历史,中国8个实体办事处(自有房产)、80名员工。赫尔纳欧洲工业品O2O跨境电商平台的线下支持。
Princetechnologies毛细管电泳德国总部采购,原装进口,保证货期。
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Prince Technologies是毛细管电泳和自动进样器设备的创新和制造专家之一。
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