检测试剂供应商
1沙门氏菌测试片
、原理及适用范围
沙门氏菌属肠道细菌科,包括那些引起食物中毒、导致肠胃炎、伤寒和副伤寒的细菌。能引起食物传播性疾病,近年来,已经成为常见的食物中毒原因。肠炎沙门氏菌感染通常源于奶制品、禽产品和肉产品;鸡肉和鸡蛋尤其是风险食品。沙门氏菌感染的症状通常是肠胃出现问题,包括恶心、腹部绞痛、呕吐和腹泻,般多持续7天。在免疫力低下的人群中,如果不及时服用抗生素类药品,沙门氏菌感染将导致生命危险。沙门氏菌测试片(FilmplateTM Salmonella BS205)含有选择性培养基、沙门氏菌有辛酯酶的显色指示剂和分子吸水凝胶,运用微生物测试片有技术,做成次性快速检验产品,步培养15~24h就可确认是否带有沙门氏菌,非常适合各级检验部门和食品企业使用。本产品适用于肉和肉产品、蛋及蛋制品、冷饮等的快速检测。参照标准:食品安全家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验(GB 4789.4)。
二、操作方法
1、样品处理:取样品25mL(g)放入含有225mL灭菌磷酸缓冲液稀释液(或生理盐水)的取样罐或均质杯内,制成1:10的样品匀液。
2、接种:将沙门氏菌测试片(BS205)置于平坦实验台面,揭开上层膜,用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上,然后再将上层膜缓慢盖下,静置10s左右,使培养基凝固,每个样品接种两片。同时做片空白阴性对照。
3、培养: 将测试片叠在起放回原自封袋中并封口。透明面朝上水平置于恒温培养箱内,堆叠片数不过12片。培养温度为36℃±1℃,培养15~24h。
三、结果判读
对测试片进行观察,呈紫红色的菌落为沙门氏菌;呈蓝色的菌落为其他菌群。出现阳性菌落的样本,好用其他更为可靠的方法进行验证,没有条件的至少要再取样重复检验次。 四、结果报告
在25mL(或25g)样品中检出或未检出沙门氏菌。
五、附加说明
1、有关验证试验表明,接纯菌种(包括硫化氢阴性菌株)可以产生典型的紫红色菌斑,其他肠杆菌呈蓝色,葡萄球菌不生长。
2、测试片具有较强的敏感性,在1.5×10-8稀释度时仍可计算出菌落。临床实际应用结果显示阳性检出率于分离培养法1.84‰,复查准确率提约13.0%(中卫生检验杂志2006,16(8):954-955)。
3、阳性确认试验推荐使用氧化酶试纸法,具体操作是:选择测试片上可疑的沙门氏菌菌落,在对应上盖膜上做好标记并编号。将氧化酶试纸贴在可疑菌落上,盖上上盖膜等待30s左右,如果氧化酶试纸颜色不变则为氧化酶阴性,可以报告25g样品沙门氏菌阳性,反之,试纸片变红,则氧化酶阳性,报告25g被检样品沙门氏菌阴性。
4、注意使用过的测试片上带有活菌,需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理。
六、保存条件
本产品需存放在4℃~10℃冰箱中,保质期为年,铝箔袋打开后,未用完的纸片要放回铝箔袋中封好,放到冰箱中,个月内用完。在湿度的环境中可能出现冷凝水,好在拆封前将整包回温至室温。
沙门氏菌属肠道细菌科,包括那些引起食物中毒、导致肠胃炎、伤寒和副伤寒的细菌。能引起食物传播性疾病,近年来,已经成为常见的食物中毒原因。肠炎沙门氏菌感染通常源于奶制品、禽产品和肉产品;鸡肉和鸡蛋尤其是风险食品。沙门氏菌感染的症状通常是肠胃出现问题,包括恶心、腹部绞痛、呕吐和腹泻,般多持续7天。在免疫力低下的人群中,如果不及时服用抗生素类药品,沙门氏菌感染将导致生命危险。沙门氏菌测试片(FilmplateTM Salmonella BS205)含有选择性培养基、沙门氏菌有辛酯酶的显色指示剂和分子吸水凝胶,运用微生物测试片有技术,做成次性快速检验产品,步培养15~24h就可确认是否带有沙门氏菌,非常适合各级检验部门和食品企业使用。本产品适用于肉和肉产品、蛋及蛋制品、冷饮等的快速检测。参照标准:食品安全家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验(GB 4789.4)。
二、操作方法
1、样品处理:取样品25mL(g)放入含有225mL灭菌磷酸缓冲液稀释液(或生理盐水)的取样罐或均质杯内,制成1:10的样品匀液。
2、接种:将沙门氏菌测试片(BS205)置于平坦实验台面,揭开上层膜,用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上,然后再将上层膜缓慢盖下,静置10s左右,使培养基凝固,每个样品接种两片。同时做片空白阴性对照。
3、培养: 将测试片叠在起放回原自封袋中并封口。透明面朝上水平置于恒温培养箱内,堆叠片数不过12片。培养温度为36℃±1℃,培养15~24h。
三、结果判读
对测试片进行观察,呈紫红色的菌落为沙门氏菌;呈蓝色的菌落为其他菌群。出现阳性菌落的样本,好用其他更为可靠的方法进行验证,没有条件的至少要再取样重复检验次。 四、结果报告
在25mL(或25g)样品中检出或未检出沙门氏菌。
五、附加说明
1、有关验证试验表明,接纯菌种(包括硫化氢阴性菌株)可以产生典型的紫红色菌斑,其他肠杆菌呈蓝色,葡萄球菌不生长。
2、测试片具有较强的敏感性,在1.5×10-8稀释度时仍可计算出菌落。临床实际应用结果显示阳性检出率于分离培养法1.84‰,复查准确率提约13.0%(中卫生检验杂志2006,16(8):954-955)。
3、阳性确认试验推荐使用氧化酶试纸法,具体操作是:选择测试片上可疑的沙门氏菌菌落,在对应上盖膜上做好标记并编号。将氧化酶试纸贴在可疑菌落上,盖上上盖膜等待30s左右,如果氧化酶试纸颜色不变则为氧化酶阴性,可以报告25g样品沙门氏菌阳性,反之,试纸片变红,则氧化酶阳性,报告25g被检样品沙门氏菌阴性。
4、注意使用过的测试片上带有活菌,需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理。
六、保存条件
本产品需存放在4℃~10℃冰箱中,保质期为年,铝箔袋打开后,未用完的纸片要放回铝箔袋中封好,放到冰箱中,个月内用完。在湿度的环境中可能出现冷凝水,好在拆封前将整包回温至室温。
2金黄色葡萄球菌测试片
、原理及适用范围
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus 简称金葡菌)是人类常见的致病菌之,其侵袭力很强,能产生多种致病物质如:肠毒素、凝固酶等;可引起化脓性炎症、毒素性疾病及葡萄球菌性肠炎。金葡菌所引起的中毒事件已成为世界性的公共卫生问题,我每年由金葡菌引起的食物中毒事件屡有报道。金黄色葡萄球菌测试片(FilmplateTM Staphylococcus aureus BT206) 含有选择性培养基和性的酶显色剂,运用微生物测试片有技术,做成次性快速检验产品,步培养15~24h就可确认是否有病原菌的存在,大大地简化了检测程序。本产品适用于各类生、熟食制品,饮料,糕点类,调味品,奶制品等的快速检测。执行标准:食品安全家标准食品微生物检验黄色葡萄球菌检验(GB 4789.10)。
二、操作方法
1、样品处理:取样品25mL(g)放入含有225mL灭菌磷酸盐缓冲液或生理盐水的取样罐或均质杯内,制成1:10的样品匀液,调节样品匀液pH至6.0~8.0。用1mL灭菌吸管吸取1:10样品匀液1mL,注入含有9mL稀释液的试管内,振摇后成为1:100的样品匀液,以此类推,每次换支吸管。
2、接种:般食品选2~3个稀释度进行检测,将金黄色葡萄球菌测试片(BT206)置于平坦实验台面,揭开上层膜,用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上,然后再将上层膜缓慢盖下,静置10s左右,使培养基凝固,每个稀释度接种两片。做片空白阴性对照。
3、培养:将测试片叠在起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒温培养箱内,堆叠片数不过12片。培养温度为36℃±1℃,培养15~24h。
三、结果判读
培养后,测试片上紫红色的菌落为金黄色葡萄球菌;呈蓝色的菌落为其他大肠菌群。出现阳性菌落的样本,好用其他更为可靠的方法进行验证,没有条件的至少要再取样重复检验次。 四、计数原则及报告方式
1、 选择菌落数在20~200个之间的纸片进行计数。
2 、若两个稀释度的菌落数均在20~200之间,则取其平均菌落数乘以稀释倍数,即为每毫升(或每克)样品中金黄色葡萄球菌数。
3、 如果所有稀释度的测试片上的菌落数都小于20,则计数稀释度低的测试片上的平均菌落数乘以稀释倍数报告之;如果所有稀释度的测试片上均无菌落生长,则以小于1乘以低稀释倍数报告之。
4 如果所有稀释度的菌落数都大于200,计数稀释度的测试片上的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。计数菌落数大于200的测试片时,也可计数个或两个具有代表性的方格内的菌落数,换算成单个方格内的菌落数后乘以20(滤纸区面积为20cm2),即为测试片上估算的菌落数。报告单位以CFU/mL(或CFU/g)表示。
五、附加说明
1、本产品对于提卫生行政监督部门应对细菌性食物中毒等突发性公共卫生事件的能力,具有重要的作用。
2、山东省疾病预防控制中心的验证结果表明,当金黄色葡萄球菌在0~9个菌落范围内时,测试片与血平板均能检出,作为致病菌不得检出的标准要求,可以作为金黄色葡萄球菌检验应用。
3、经试验,该测试片的检测灵敏度,异性强,重复性好。对纯菌的检测下限可达3cfu/mL,与营养琼脂计数、Baird-Parker培养计数和显色培养基计数比较,检测结果均无显著差异。(食品研究与开发2009,30(1):94-97)
4、注意使用过的测试片上带有活菌,需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理。
六、保存条件
本产品需存放在4℃~10℃冰箱中,保质期为年,铝箔袋打开后,未用完的纸片要放回铝箔袋中封好,放到冰箱中,个月内用完。在湿度的环境中可能出现冷凝水,好在拆封前将整包回温至室温。
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus 简称金葡菌)是人类常见的致病菌之,其侵袭力很强,能产生多种致病物质如:肠毒素、凝固酶等;可引起化脓性炎症、毒素性疾病及葡萄球菌性肠炎。金葡菌所引起的中毒事件已成为世界性的公共卫生问题,我每年由金葡菌引起的食物中毒事件屡有报道。金黄色葡萄球菌测试片(FilmplateTM Staphylococcus aureus BT206) 含有选择性培养基和性的酶显色剂,运用微生物测试片有技术,做成次性快速检验产品,步培养15~24h就可确认是否有病原菌的存在,大大地简化了检测程序。本产品适用于各类生、熟食制品,饮料,糕点类,调味品,奶制品等的快速检测。执行标准:食品安全家标准食品微生物检验黄色葡萄球菌检验(GB 4789.10)。
二、操作方法
1、样品处理:取样品25mL(g)放入含有225mL灭菌磷酸盐缓冲液或生理盐水的取样罐或均质杯内,制成1:10的样品匀液,调节样品匀液pH至6.0~8.0。用1mL灭菌吸管吸取1:10样品匀液1mL,注入含有9mL稀释液的试管内,振摇后成为1:100的样品匀液,以此类推,每次换支吸管。
2、接种:般食品选2~3个稀释度进行检测,将金黄色葡萄球菌测试片(BT206)置于平坦实验台面,揭开上层膜,用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上,然后再将上层膜缓慢盖下,静置10s左右,使培养基凝固,每个稀释度接种两片。做片空白阴性对照。
3、培养:将测试片叠在起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒温培养箱内,堆叠片数不过12片。培养温度为36℃±1℃,培养15~24h。
三、结果判读
培养后,测试片上紫红色的菌落为金黄色葡萄球菌;呈蓝色的菌落为其他大肠菌群。出现阳性菌落的样本,好用其他更为可靠的方法进行验证,没有条件的至少要再取样重复检验次。 四、计数原则及报告方式
1、 选择菌落数在20~200个之间的纸片进行计数。
2 、若两个稀释度的菌落数均在20~200之间,则取其平均菌落数乘以稀释倍数,即为每毫升(或每克)样品中金黄色葡萄球菌数。
3、 如果所有稀释度的测试片上的菌落数都小于20,则计数稀释度低的测试片上的平均菌落数乘以稀释倍数报告之;如果所有稀释度的测试片上均无菌落生长,则以小于1乘以低稀释倍数报告之。
4 如果所有稀释度的菌落数都大于200,计数稀释度的测试片上的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。计数菌落数大于200的测试片时,也可计数个或两个具有代表性的方格内的菌落数,换算成单个方格内的菌落数后乘以20(滤纸区面积为20cm2),即为测试片上估算的菌落数。报告单位以CFU/mL(或CFU/g)表示。
五、附加说明
1、本产品对于提卫生行政监督部门应对细菌性食物中毒等突发性公共卫生事件的能力,具有重要的作用。
2、山东省疾病预防控制中心的验证结果表明,当金黄色葡萄球菌在0~9个菌落范围内时,测试片与血平板均能检出,作为致病菌不得检出的标准要求,可以作为金黄色葡萄球菌检验应用。
3、经试验,该测试片的检测灵敏度,异性强,重复性好。对纯菌的检测下限可达3cfu/mL,与营养琼脂计数、Baird-Parker培养计数和显色培养基计数比较,检测结果均无显著差异。(食品研究与开发2009,30(1):94-97)
4、注意使用过的测试片上带有活菌,需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理。
六、保存条件
本产品需存放在4℃~10℃冰箱中,保质期为年,铝箔袋打开后,未用完的纸片要放回铝箔袋中封好,放到冰箱中,个月内用完。在湿度的环境中可能出现冷凝水,好在拆封前将整包回温至室温。
3餐具大肠菌群快速检验纸片
、适用范围
适用于餐(饮)具、食品加工器具等表面卫生状况的测定。
二、产品点
大肠菌群多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方,用大肠菌群数作为餐具消毒效果的监测指标,具有很好的代表性和很的灵敏度。纸片法与传统发酵法有很的符合率,而且使用方便,15个小时就可以出结果,已经成为家标准方法,为各地卫生监督部门所广泛采用。本品也可以用于食品生产企业、餐厅、医院、旅业、浴池等场所的物体表面,以及从业人员手和衣物等方面卫生质量的监测。
执行标准:食(饮)具消毒卫生标准——纸片法采样和检验(GB 14934)。
三、采样
1、随机抽取消毒后准备使用的各类食具(碗、盘、杯等),取样量可根据大、中、小不同饮食行业每次采样6~10件,每件贴纸片两张,每张纸片面积25cm2(5cm×5cm)。用无菌生理盐水湿润大肠菌群检验纸片后,立即贴于食具内侧表面,30s后取下,置于无菌塑料袋内。
2、筷子以5支为件样品,用灭菌1mL吸管吸取无菌生理盐水湿润纸片后,立即将筷子进口端(约5cm)抹拭纸片,每件样品抹拭两张,放入无菌塑料袋内。
四、培养
将已采样的纸片置于37℃恒温培养箱中培养15~18h,取出观察结果。
五、结果判读
1、若纸片变黄或在黄色背景上呈现红色斑点为大肠菌群阳性,纸片保持紫兰色不变或在紫兰色背景上呈现红色斑点但周围没有黄晕均为大肠菌群阴性。
2、家标准规定:在50cm2的纸片上(即两片纸片上)大肠菌群不得检出。
六、保存条件
本产品需存放在4℃~10℃冰箱中,保质期为年,铝箔袋打开后,未用完的纸片要放回铝箔袋中封好,放到冰箱中,个月内用完。在湿度的环境中可能出现冷凝水,好在拆封前将整包回温至室温。
适用于餐(饮)具、食品加工器具等表面卫生状况的测定。
二、产品点
大肠菌群多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方,用大肠菌群数作为餐具消毒效果的监测指标,具有很好的代表性和很的灵敏度。纸片法与传统发酵法有很的符合率,而且使用方便,15个小时就可以出结果,已经成为家标准方法,为各地卫生监督部门所广泛采用。本品也可以用于食品生产企业、餐厅、医院、旅业、浴池等场所的物体表面,以及从业人员手和衣物等方面卫生质量的监测。
执行标准:食(饮)具消毒卫生标准——纸片法采样和检验(GB 14934)。
三、采样
1、随机抽取消毒后准备使用的各类食具(碗、盘、杯等),取样量可根据大、中、小不同饮食行业每次采样6~10件,每件贴纸片两张,每张纸片面积25cm2(5cm×5cm)。用无菌生理盐水湿润大肠菌群检验纸片后,立即贴于食具内侧表面,30s后取下,置于无菌塑料袋内。
2、筷子以5支为件样品,用灭菌1mL吸管吸取无菌生理盐水湿润纸片后,立即将筷子进口端(约5cm)抹拭纸片,每件样品抹拭两张,放入无菌塑料袋内。
四、培养
将已采样的纸片置于37℃恒温培养箱中培养15~18h,取出观察结果。
五、结果判读
1、若纸片变黄或在黄色背景上呈现红色斑点为大肠菌群阳性,纸片保持紫兰色不变或在紫兰色背景上呈现红色斑点但周围没有黄晕均为大肠菌群阴性。
2、家标准规定:在50cm2的纸片上(即两片纸片上)大肠菌群不得检出。
六、保存条件
本产品需存放在4℃~10℃冰箱中,保质期为年,铝箔袋打开后,未用完的纸片要放回铝箔袋中封好,放到冰箱中,个月内用完。在湿度的环境中可能出现冷凝水,好在拆封前将整包回温至室温。
4食品大肠菌群快速检验纸片
、原理及适用范围
将乳糖胆盐选择性培养基和TTC显色剂加载在纸片上,经培养后能够在纸片上生长并发酵乳糖产酸的即为大肠菌群阳性,记录每个稀释度大肠菌群阳性纸片数,根据大肠菌群MPN表查出相应的大肠菌群数。 食品大肠菌群检验纸片法与标法中的九管法相对应,将原来几步的试验简化为步,时间由78h缩短为24h以内,省去了制备培养基、消毒和培养器皿的清洗处理等大量辅助性工作,随时可以打开包装进行抽样检测。 执行标准:食品安全家标准 食品微生物检验大肠菌群计数MPN计数法(GB 4789.3)。
适用于各类食品、饮料等样品中大肠菌群的快速测定。
二、操作方法
1、样品处理:按无菌操作称取样品25g(或25mL)放入含有225mL灭菌磷酸缓冲液稀释液(或生理盐水)的取样瓶或均质杯中,经充分振摇做成1:10的样品匀液。样品匀液的pH值应在6.5~7.5之间,必要时用1mol/L氢氧化钠或1mol/L盐酸调节。用1mL灭菌吸管吸取1:10样品匀液,注入含有9mL稀释液的试管内,振摇试管制成1:100的样品匀液。根据对样品污染状况的估计,按上述操作,次制成10倍递增系列稀释样品匀液。每递增稀释1次,换支1mL无菌吸管或吸头。从制备样品匀液至样品接种完毕,全过程不得过15min。
2、接种
(1)选取两个稀释度进行接种,普通食品般采用1:10和1:100这两个稀释度,饮料采用原液和1:10两个稀释度。本品每份由三片大纸片(接10mL,袋中二片叠放算作大片),六片小纸片(接1mL)组成。
(2)用灭菌吸管吸取10mL 1:10样品匀液加到含有大纸片的塑料袋中(相当于接样品1g),吸透后平放,做三个重复。再用1mL灭菌吸管吸取1mL同稀释度的样品匀液加到含有小纸片的塑料袋中(相当于接样品0.1g),做三个重复。再另取支1mL灭菌吸管吸取1mL 1:100样品匀液加到含有小纸片的塑料袋中(相当于接样品0.01g),做三个重复。
(3)培养:将接种好的纸片(可叠放)放入36℃±1℃培养箱中培养15~24h。
三、大肠菌群可能数(MPN)的报告
1、若纸片变黄或在黄色背景上呈现红色斑点为大肠菌群阳性纸片。纸片保持紫蓝色不变或在紫蓝色背景上呈现红色斑点,但周围没有黄色均为大肠菌群阴性纸片。
2、记录每个稀释度大肠菌群阳性纸片数,根据《食品饮料大肠菌群MPN表》查出相应的大肠菌群数。
3、如接种的第个梯度为原液,应将表上查出的结果除以10。
四、注意事项
新的家标准所用的单位改为每克(或毫升)检样中大肠菌群可能数,标准的接种量为0.333g(mL),MPN表也是由此而设计。而使用本品的标准接种量为33g(mL),大纸片接种10mL 1:10样品匀液相当于1g样品,因而表内数字应相应降低10倍。饮料样品的接种量为33mL,大纸片接种10mL样品原液,表内数字应降低100倍。
五、保存条件
本产品需存放在4℃~10℃冰箱中,保质期为年,铝箔袋打开后,未用完的纸片要放回铝箔袋中封好,放到冰箱中,个月内用完。在湿度的环境中可能出现冷凝水,好在拆封前将整包回温至室温。
将乳糖胆盐选择性培养基和TTC显色剂加载在纸片上,经培养后能够在纸片上生长并发酵乳糖产酸的即为大肠菌群阳性,记录每个稀释度大肠菌群阳性纸片数,根据大肠菌群MPN表查出相应的大肠菌群数。 食品大肠菌群检验纸片法与标法中的九管法相对应,将原来几步的试验简化为步,时间由78h缩短为24h以内,省去了制备培养基、消毒和培养器皿的清洗处理等大量辅助性工作,随时可以打开包装进行抽样检测。 执行标准:食品安全家标准 食品微生物检验大肠菌群计数MPN计数法(GB 4789.3)。
适用于各类食品、饮料等样品中大肠菌群的快速测定。
二、操作方法
1、样品处理:按无菌操作称取样品25g(或25mL)放入含有225mL灭菌磷酸缓冲液稀释液(或生理盐水)的取样瓶或均质杯中,经充分振摇做成1:10的样品匀液。样品匀液的pH值应在6.5~7.5之间,必要时用1mol/L氢氧化钠或1mol/L盐酸调节。用1mL灭菌吸管吸取1:10样品匀液,注入含有9mL稀释液的试管内,振摇试管制成1:100的样品匀液。根据对样品污染状况的估计,按上述操作,次制成10倍递增系列稀释样品匀液。每递增稀释1次,换支1mL无菌吸管或吸头。从制备样品匀液至样品接种完毕,全过程不得过15min。
2、接种
(1)选取两个稀释度进行接种,普通食品般采用1:10和1:100这两个稀释度,饮料采用原液和1:10两个稀释度。本品每份由三片大纸片(接10mL,袋中二片叠放算作大片),六片小纸片(接1mL)组成。
(2)用灭菌吸管吸取10mL 1:10样品匀液加到含有大纸片的塑料袋中(相当于接样品1g),吸透后平放,做三个重复。再用1mL灭菌吸管吸取1mL同稀释度的样品匀液加到含有小纸片的塑料袋中(相当于接样品0.1g),做三个重复。再另取支1mL灭菌吸管吸取1mL 1:100样品匀液加到含有小纸片的塑料袋中(相当于接样品0.01g),做三个重复。
(3)培养:将接种好的纸片(可叠放)放入36℃±1℃培养箱中培养15~24h。
三、大肠菌群可能数(MPN)的报告
1、若纸片变黄或在黄色背景上呈现红色斑点为大肠菌群阳性纸片。纸片保持紫蓝色不变或在紫蓝色背景上呈现红色斑点,但周围没有黄色均为大肠菌群阴性纸片。
2、记录每个稀释度大肠菌群阳性纸片数,根据《食品饮料大肠菌群MPN表》查出相应的大肠菌群数。
3、如接种的第个梯度为原液,应将表上查出的结果除以10。
四、注意事项
新的家标准所用的单位改为每克(或毫升)检样中大肠菌群可能数,标准的接种量为0.333g(mL),MPN表也是由此而设计。而使用本品的标准接种量为33g(mL),大纸片接种10mL 1:10样品匀液相当于1g样品,因而表内数字应相应降低10倍。饮料样品的接种量为33mL,大纸片接种10mL样品原液,表内数字应降低100倍。
五、保存条件
本产品需存放在4℃~10℃冰箱中,保质期为年,铝箔袋打开后,未用完的纸片要放回铝箔袋中封好,放到冰箱中,个月内用完。在湿度的环境中可能出现冷凝水,好在拆封前将整包回温至室温。
食品、饮料大肠菌群(MPN)检索表
阳性纸片数 | MPN | 95%可信限 | 阳性纸片数 | MPN | 95%可信限 | ||||||
0.10 | 0.01 | 0.001 | 下限 | 上限 | 0.10 | 0.01 | 0.001 | 下限 | 上限 | ||
0 0 0 0 |
0 0 1 1 |
0 1 0 1 |
<3.0 3.0 3.0 6.1 |
- 0.15 0.15 1.2 |
9.5 9.6 11 18 |
2 2 2 2 |
2 2 2 3 |
0 1 2 0 |
21 28 35 29 |
4.5 8.7 8.7 8.7 |
42 94 94 94 |
0 0 1 1 |
2 3 0 0 |
0 0 0 1 |
6.2 9.4 3.6 7.2 |
1.2 3.6 0.17 1.3 |
18 38 18 18 |
2 3 3 3 |
3 0 0 0 |
1 0 1 2 |
36 23 38 64 |
8.7 4.6 8.7 17 |
94 94 110 180 |
1 1 1 1 |
0 1 1 2 |
2 0 1 0 |
11 7.4 11 11 |
3.6 1.3 3.6 3.6 |
38 20 38 42 |
3 3 3 3 |
1 1 1 1 |
0 1 2 3 |
43 75 120 160 |
9 17 37 40 |
180 200 420 420 |
1 1 2 2 |
2 3 0 0 |
1 0 0 1 |
15 16 9.2 14 |
4.5 4.5 1.4 3.6 |
42 42 38 42 |
3 3 3 3 |
2 2 2 2 |
0 1 2 3 |
93 150 210 290 |
18 37 40 90 |
420 420 430 1000 |
2 2 2 2 |
0 1 1 1 |
2 0 1 2 |
20 15 20 27 |
4.5 3.7 4.5 8.7 |
42 42 42 94 |
3 3 3 3 |
3 3 3 3 |
0 1 2 3 |
240 460 1100 <1100 |
42 90 180 420 |
1000 2000 4100 - |
注1:本表采用3个稀释度〔0.1g(或0.1ml)、0.01g(或0.01ml)、和0.001g(或0.001ml)〕,每个稀释度接种3片。 注2:表内所列检样量如改用1g(或1ml)、0.1g(或0.1ml)、和0.01g(或0.01ml)时,表内数字应相应降低10倍;如改用0.01g(或0.01ml)、0.001g(或0.001ml)、和0.0001g(或0.0001ml)时,则表内数字应相应增10倍,其余类推。 |
5菌落总数测试片
、原理及适用范围
菌落总数是指样品经过处理,在定条件下培养后所得1mL(g)检样或单位面积样品中所含菌落的总数,是常用的微生物检测项目。菌落总数测试片(FilmplateTM Aerobic BB202)是种预先制备好的次性培养基产品,含有标准的营养培养基,冷水可溶性的吸水凝胶和脱氢酶指示剂氯化三苯基四氮唑(TTC),菌落在测试片上呈红色,这样可缩短计数时间和增强计数效果。本产品适合于各类食品及食品原料中菌落总数的测定,也可用于检测食品加工容器、操作台和其他设备表面的菌落总数。执行标准:食品安全家标准 食品微生物学检验菌落总数测定(GB 4789.2)。
二、操作方法
1、样品处理:取样品25mL(g)放入含有225mL灭菌磷酸缓冲液稀释液(或生理盐水)的取样罐或均质杯内,制成1:10的样品匀液,必要时用1mol/LNaOH或1mol/L HCl溶液调节样品匀液pH至6.6~7.2。用1mL灭菌吸管吸取1:10样品匀液1mL,注入含有9mL稀释液的试管内,振摇后成为1:100的样品匀液,以此类推,做出1:1000等稀释度的样品匀液,每次换支吸管。
2、接种:般食品选2~3个稀释度进行检测,含菌量少的液体样品(如饮用纯水和矿泉水等)可直接吸取原液进行检测。将菌落总数测试片(BB202)置于平坦实验台面,揭开上层膜,用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上,然后再将上层膜缓慢盖下,静置10s左右使培养基凝固,每个稀释度接种两片。同时做片空白阴性对照。
3、培养:将测试片叠在起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒温培养箱内,堆叠片数不过12片。般食品培养温度为36℃±1℃,培养15~24h;水产品培养温度为30℃±1℃,培养48h。
三、结果判读
细菌在测试片上生长后会显示红色斑点,选择菌落数适中(30~300个)的测试片进行计数,乘以稀释倍数后即为每毫升(或每克)样品中所含的细菌菌落总数。 四、计数原则及报告方式
1、若只有个稀释度纸片上的菌落数在适宜计数范围内,计算两个纸片菌落数的平均值,再将平均值乘以相应稀释倍数,作为每毫升(或克)样品中菌落总数结果。
2、若有两个连续稀释度的纸片菌落数在适宜计数范围内时,按式(1)计算:
式中:
N——样品中菌落数;
∑C——测试片上(含适宜范围菌落数的测试片)菌落数之和;
n1——第个适宜稀释度测试片数;
n2——第二个适宜稀释度测试片数;
d——稀释因子(第稀释度)。
示例:
上述数据经“四舍五入”后,表示25000或2.5×104。
3、若所有的稀释度菌落总数均大于300CFU,则对稀释度的测试片进行计数,其他测试片可记录为多不可计,结果按平均菌落数乘以稀释倍数计算。
4、若所有的稀释度菌落总数均小于30CFU,则应按稀释度低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。
5、若所有的稀释度(包括液体样品原液)均无菌落生长,则以小于1乘以低稀释倍数计算。
6、若所有稀释度的平均菌落数均不在30CFU~300CFU之间,其中部分小于30CFU或大于300CFU,则以接近30CFU或300CFU的平均菌落数乘以稀释倍数计算。
7、菌落总数的报告
(1)菌落总数在100CFU以内时,按“四舍五入”原则修约,采用两位有效数字报告。
(2)大于或等于100CFU时,第三位数字采用“四舍五入”原则修约后,取前两位数字,后面的0代替位数,也可用10的指数形式来表示,按“四舍五入”原则修约后,采用两位有效数字。
(3)若测试片上片红色无法计数时,则报告多不可计。
(4)若空白对照上有菌落生长,则此次检测结果无效。
(5)称重取样以CFU/g为单位报告,体积取样以CFU/mL为单位报告。
五、表面取样方法
加1mL灭菌磷酸缓冲液(或生理盐水)在测试片上,至少静置10S,使培养基凝固;提起上层膜,使中央滤纸部分贴到待测物表面,用手在外侧轻压;然后将上盖膜合上,置培养箱内培养。
六、附加说明
1、菌落总数测试片检测结果与传统平板计数琼脂平板法符合率可达80%以上,山东省疾病预防控制中心进行的验证试验表明,24h计数测试片上菌落数为平板菌落数的87%。
2、磷酸缓冲液稀释液的配制与灭菌:贮存液:称取34.0g的磷酸二氢钾溶于500mL蒸馏水中,用大约175mL的1mol/L氢氧化钠溶液调节pH至7.2,用蒸馏水稀释至1000mL后贮存于冰箱。稀释液:取贮存液1.25mL,用蒸馏水稀释至1000mL,分装于适宜容器中,121℃压灭菌15分钟,或者放入消毒碗柜中消毒。
3、生理盐水的配制与灭菌:取8.5g分析纯氯化钠(NaCl)溶解到1000mL蒸馏水或纯净水中,先煮开后进行分装,取9mL加入到10mL洁净试管中,盖上硅橡胶塞或棉纱塞,放入红外线消毒柜中消毒。
七、保存条件
本产品需存放在4℃~10℃冰箱中,保质期为年,铝箔袋打开后,未用完的纸片要放回铝箔袋中封好,放到冰箱中,个月内用完。在湿度的环境中可能出现冷凝水,好在拆封前将整包回温至室温。
菌落总数是指样品经过处理,在定条件下培养后所得1mL(g)检样或单位面积样品中所含菌落的总数,是常用的微生物检测项目。菌落总数测试片(FilmplateTM Aerobic BB202)是种预先制备好的次性培养基产品,含有标准的营养培养基,冷水可溶性的吸水凝胶和脱氢酶指示剂氯化三苯基四氮唑(TTC),菌落在测试片上呈红色,这样可缩短计数时间和增强计数效果。本产品适合于各类食品及食品原料中菌落总数的测定,也可用于检测食品加工容器、操作台和其他设备表面的菌落总数。执行标准:食品安全家标准 食品微生物学检验菌落总数测定(GB 4789.2)。
二、操作方法
1、样品处理:取样品25mL(g)放入含有225mL灭菌磷酸缓冲液稀释液(或生理盐水)的取样罐或均质杯内,制成1:10的样品匀液,必要时用1mol/LNaOH或1mol/L HCl溶液调节样品匀液pH至6.6~7.2。用1mL灭菌吸管吸取1:10样品匀液1mL,注入含有9mL稀释液的试管内,振摇后成为1:100的样品匀液,以此类推,做出1:1000等稀释度的样品匀液,每次换支吸管。
2、接种:般食品选2~3个稀释度进行检测,含菌量少的液体样品(如饮用纯水和矿泉水等)可直接吸取原液进行检测。将菌落总数测试片(BB202)置于平坦实验台面,揭开上层膜,用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上,然后再将上层膜缓慢盖下,静置10s左右使培养基凝固,每个稀释度接种两片。同时做片空白阴性对照。
3、培养:将测试片叠在起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒温培养箱内,堆叠片数不过12片。般食品培养温度为36℃±1℃,培养15~24h;水产品培养温度为30℃±1℃,培养48h。
三、结果判读
细菌在测试片上生长后会显示红色斑点,选择菌落数适中(30~300个)的测试片进行计数,乘以稀释倍数后即为每毫升(或每克)样品中所含的细菌菌落总数。 四、计数原则及报告方式
1、若只有个稀释度纸片上的菌落数在适宜计数范围内,计算两个纸片菌落数的平均值,再将平均值乘以相应稀释倍数,作为每毫升(或克)样品中菌落总数结果。
2、若有两个连续稀释度的纸片菌落数在适宜计数范围内时,按式(1)计算:
式中:
N——样品中菌落数;
∑C——测试片上(含适宜范围菌落数的测试片)菌落数之和;
n1——第个适宜稀释度测试片数;
n2——第二个适宜稀释度测试片数;
d——稀释因子(第稀释度)。
示例:
上述数据经“四舍五入”后,表示25000或2.5×104。
3、若所有的稀释度菌落总数均大于300CFU,则对稀释度的测试片进行计数,其他测试片可记录为多不可计,结果按平均菌落数乘以稀释倍数计算。
4、若所有的稀释度菌落总数均小于30CFU,则应按稀释度低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。
5、若所有的稀释度(包括液体样品原液)均无菌落生长,则以小于1乘以低稀释倍数计算。
6、若所有稀释度的平均菌落数均不在30CFU~300CFU之间,其中部分小于30CFU或大于300CFU,则以接近30CFU或300CFU的平均菌落数乘以稀释倍数计算。
7、菌落总数的报告
(1)菌落总数在100CFU以内时,按“四舍五入”原则修约,采用两位有效数字报告。
(2)大于或等于100CFU时,第三位数字采用“四舍五入”原则修约后,取前两位数字,后面的0代替位数,也可用10的指数形式来表示,按“四舍五入”原则修约后,采用两位有效数字。
(3)若测试片上片红色无法计数时,则报告多不可计。
(4)若空白对照上有菌落生长,则此次检测结果无效。
(5)称重取样以CFU/g为单位报告,体积取样以CFU/mL为单位报告。
五、表面取样方法
加1mL灭菌磷酸缓冲液(或生理盐水)在测试片上,至少静置10S,使培养基凝固;提起上层膜,使中央滤纸部分贴到待测物表面,用手在外侧轻压;然后将上盖膜合上,置培养箱内培养。
六、附加说明
1、菌落总数测试片检测结果与传统平板计数琼脂平板法符合率可达80%以上,山东省疾病预防控制中心进行的验证试验表明,24h计数测试片上菌落数为平板菌落数的87%。
2、磷酸缓冲液稀释液的配制与灭菌:贮存液:称取34.0g的磷酸二氢钾溶于500mL蒸馏水中,用大约175mL的1mol/L氢氧化钠溶液调节pH至7.2,用蒸馏水稀释至1000mL后贮存于冰箱。稀释液:取贮存液1.25mL,用蒸馏水稀释至1000mL,分装于适宜容器中,121℃压灭菌15分钟,或者放入消毒碗柜中消毒。
3、生理盐水的配制与灭菌:取8.5g分析纯氯化钠(NaCl)溶解到1000mL蒸馏水或纯净水中,先煮开后进行分装,取9mL加入到10mL洁净试管中,盖上硅橡胶塞或棉纱塞,放入红外线消毒柜中消毒。
七、保存条件
本产品需存放在4℃~10℃冰箱中,保质期为年,铝箔袋打开后,未用完的纸片要放回铝箔袋中封好,放到冰箱中,个月内用完。在湿度的环境中可能出现冷凝水,好在拆封前将整包回温至室温。
6表面洁净度速测卡
、适用范围:
本方法适用于餐饮具和食物加工器具表面洁净程度的快速检测。
二、适用方法
1、滴2滴湿润剂于被测物体表面。
2、取出片洁净度速测卡,圆型药片向下,于物体表面10×10cm大小面积范围内交叉来回轻轻擦拭。
3、将洁净度速测卡圆型药片向上平放在台面上。
4、滴1滴显色剂到圆型药片上,如果物体表面较脏的话,1min内药片就会变为紫色,即可判定被检物体不洁净,否则需要等待10mai与标准比色板进行比较确定结果。
三、结果判定:
绿色表示洁净,灰色表示处于洁净与不洁净的边缘,紫色表示不洁净,深紫色表示重度不洁净。
四、注意事项
1、每片产品只可以使用次,不可重复使用。
2、擦拭的关键控制点应考虑从易清洁到难清洁的区域范围,比如平面、接缝、凹陷区域、混合机桨叶等。
3、不需要手接触圆型药片,确保药片部位仅与要检测的物体表面接触。
4、如果检测的控制点有肉眼可见的污垢,就不要再浪费速测卡去评估其洁净度。产品只用来检测看起来洁净的表面。
5、如果待检表面有多余液体存在,应等至液体稍干燥后再进行检测。
五、产品储藏与效期:
本产品常温保存有效期为12月,低温(4℃~10℃)冷藏保存有效期为18个月。
本方法适用于餐饮具和食物加工器具表面洁净程度的快速检测。
二、适用方法
1、滴2滴湿润剂于被测物体表面。
2、取出片洁净度速测卡,圆型药片向下,于物体表面10×10cm大小面积范围内交叉来回轻轻擦拭。
3、将洁净度速测卡圆型药片向上平放在台面上。
4、滴1滴显色剂到圆型药片上,如果物体表面较脏的话,1min内药片就会变为紫色,即可判定被检物体不洁净,否则需要等待10mai与标准比色板进行比较确定结果。
三、结果判定:
绿色表示洁净,灰色表示处于洁净与不洁净的边缘,紫色表示不洁净,深紫色表示重度不洁净。
四、注意事项
1、每片产品只可以使用次,不可重复使用。
2、擦拭的关键控制点应考虑从易清洁到难清洁的区域范围,比如平面、接缝、凹陷区域、混合机桨叶等。
3、不需要手接触圆型药片,确保药片部位仅与要检测的物体表面接触。
4、如果检测的控制点有肉眼可见的污垢,就不要再浪费速测卡去评估其洁净度。产品只用来检测看起来洁净的表面。
5、如果待检表面有多余液体存在,应等至液体稍干燥后再进行检测。
五、产品储藏与效期:
本产品常温保存有效期为12月,低温(4℃~10℃)冷藏保存有效期为18个月。
7农药残留快速检测卡
农药残留快速检测卡的检测原理
依据的家标准方法:家标准方法GB/T5009.199-2003《蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速检测》
农药残留快速检测卡的使用方法
● 采样:选取有代表性的蔬菜样品,擦去表面泥土,剪成1cm左右见方碎片,取5g放入带盖瓶中,加入10mL纯净水或缓冲溶液,震摇50次,静置2min以上,待用。
● 检测步骤:取片速测卡,中间线对折,放置加热到指定温度的便携式农药残留检测仪检测槽中,提取样品液滴加入白色药片,仪器加热到38℃后放置10min。预反应后的药片表面必须保持湿润。再盖上盖子显色3分钟,进行判断。
农药残留快速检测卡检测结果判断
显浅蓝色为弱阳性结果,说明农药残留量相对较低;D、白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同,为阴性结果;E、对阳性结果的样品,可用其它分析方法进步确定具体农药品种和含量。
农药残留快速检测卡使用注意事项
● 葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中,含有对酶有影响的植物次生物质,容易产生假阳性。处理这类样品时,可采取整株(体)蔬菜浸提或采用表面测定法。对些含叶绿素较的蔬菜,也可采取整株(体)蔬菜浸提的方法,减少色素的干扰。
● 当温度条件低于37°C,酶反应的速度随之放慢,药片加液后放置反应的时间应相对延长,延长时间的确定,应以空白对照卡可以变蓝,即可往下操作。注意样品放置的时间应与空白对照卡放置的时间致才有可比性。空白对照卡不变色的原因:是药片表面缓冲溶液加的少、预反应后的药片表面不够湿润,二是温度太低。
● 速测卡对农药非常敏感,测定时如果附近喷洒农药或使用卫生杀虫剂,以及操作者和器具沾有微量农药,都会造成对照和测定药片不变蓝。
● 红色药片与白色药片叠合反应的时间以3min为准,3min后蓝色会逐渐加深,24h后颜色会逐渐退去。
依据的家标准方法:家标准方法GB/T5009.199-2003《蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速检测》
农药残留快速检测卡的使用方法
● 采样:选取有代表性的蔬菜样品,擦去表面泥土,剪成1cm左右见方碎片,取5g放入带盖瓶中,加入10mL纯净水或缓冲溶液,震摇50次,静置2min以上,待用。
● 检测步骤:取片速测卡,中间线对折,放置加热到指定温度的便携式农药残留检测仪检测槽中,提取样品液滴加入白色药片,仪器加热到38℃后放置10min。预反应后的药片表面必须保持湿润。再盖上盖子显色3分钟,进行判断。
农药残留快速检测卡检测结果判断
显浅蓝色为弱阳性结果,说明农药残留量相对较低;D、白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同,为阴性结果;E、对阳性结果的样品,可用其它分析方法进步确定具体农药品种和含量。
农药残留快速检测卡使用注意事项
● 葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中,含有对酶有影响的植物次生物质,容易产生假阳性。处理这类样品时,可采取整株(体)蔬菜浸提或采用表面测定法。对些含叶绿素较的蔬菜,也可采取整株(体)蔬菜浸提的方法,减少色素的干扰。
● 当温度条件低于37°C,酶反应的速度随之放慢,药片加液后放置反应的时间应相对延长,延长时间的确定,应以空白对照卡可以变蓝,即可往下操作。注意样品放置的时间应与空白对照卡放置的时间致才有可比性。空白对照卡不变色的原因:是药片表面缓冲溶液加的少、预反应后的药片表面不够湿润,二是温度太低。
● 速测卡对农药非常敏感,测定时如果附近喷洒农药或使用卫生杀虫剂,以及操作者和器具沾有微量农药,都会造成对照和测定药片不变蓝。
● 红色药片与白色药片叠合反应的时间以3min为准,3min后蓝色会逐渐加深,24h后颜色会逐渐退去。
8售后服务
检测试剂的售后服务:
从售出的年里,在正确正常使用、服务的前提下,元器件和加工方面可保证无任何故障。万出现这方面问题,请将仪器退回河南省哲瀚电子科技有限公司,我们将负责维修或更换(视具体情况而定)。
由于外观损伤,使用不当,缺乏规定的维护或违反要求而造成的损坏,不属本公司担保范围内。此保证可替代任何其他形式的保证,对任何偶然或必然的损坏我们概不负责。
从售出的年里,在正确正常使用、服务的前提下,元器件和加工方面可保证无任何故障。万出现这方面问题,请将仪器退回河南省哲瀚电子科技有限公司,我们将负责维修或更换(视具体情况而定)。
由于外观损伤,使用不当,缺乏规定的维护或违反要求而造成的损坏,不属本公司担保范围内。此保证可替代任何其他形式的保证,对任何偶然或必然的损坏我们概不负责。
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